Baird Parker Agar Was ist, Foundation, Vorbereitung, Verwendung

Er Baird Parker Agar oder Eigelb -Agar ist ein solides, selektives und differentielles Kulturmedium. Es wurde 1962 zum Nachweis und der Anzahl von positiven Koagulase -Staphylococci (CoagulaseStaphylococcus aureus).

Es besteht aus Pankreas -Kasein -hydrolysiertem, Fleischextrakt, Hefeextrakt, Lithiumchlorid, Glycin, Natriumpyruvat, Kaliumtelurit, Griff und Eigelbemulsion.

Typische Kolonien von Staphylococcus aureus in Baird Parker Altern. Quelle: Daizy John [CC von 4.0 (https: // creativecommons.Org/lizenzen/bis/4.0)]]

Baird Parker Agar basiert auf der Kapazität der S. aureus Telurito reduzieren und Lecithinase produzieren. Beide Eigenschaften erzeugen eine Kolonie mit spezifischen Eigenschaften für diese Art. Daher bietet es eine große Wirksamkeit bei der Erkennung dieses Mikroorganismus.

Die typischen Kolonien von S. aureus Sie sind schwarz oder dunkelgrau, mit farbloser Kante und einem klaren Halo, der sie umgibt, und unterscheidet sich vom Rest der Mikroorganismen. Dieser Erreger kann in klinischen Proben, Gewässern, Kosmetika und rohen oder gekochten Lebensmitteln gefunden werden.

Seine Diagnose oder Erkennung ist aufgrund der Vielfalt der erzeugten Pathologien wie Lebensmittelvergiftung, verteiltes Hautsyndrom, toxisches Schocksyndrom, Abszesse, Meningitis, Septikämie und Endokarditis von größter Bedeutung.

Basis

Ernährungskraft

Casein -Pankreashydrolysierte, Fleischextrakt und Hefeextrakt sind die Quellen von Nährstoffen, Vitaminen und Mineralien, die für die mikrobielle allgemeine Entwicklung erforderlich sind, während Pyruvat und Glycin Verbindungen sind Staphylococcus aureus.

Selektiv

Der Baird Parker -Agar ist selektiv, weil er Substanzen enthält, die das Wachstum der dazugehörigen Flora hemmen, und gleichzeitig die Entwicklung von zugunsten S. aureus. Inhibitorische Verbindungen sind Lithiumchlorid und Kaliumtellurit.

Differential

Dieses Medium ermöglicht die Unterscheidung der S. aureus des Restes der negativen Koagulase -Staphylokokken. S. aureus Es hat die Fähigkeit, das Telurit auf schwarze Metallic -Teluro zu reduzieren und schwarze oder dunkelgraue Kolonien zu bilden.

Ebenso liefert das Eigelb die Substrate, um das Vorhandensein des Lektinase- und Lipasa -Enzyms zu demonstrieren. S. aureus Es ist eine positive Lecithinase und daher wird in der Kolonie ein klarer Halo beobachtet, was darauf hinweist, dass das Lecithin hydrolysiert wurde.

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In diesem Sinne das Aussehen in diesem schwarzen oder hellen schwarzen oder grau -Gray -Dickdarm S. aureus. 

Wenn eine Niederschlagszone gebildet wird, ist dies ein Hinweis darauf, dass die Lipase aktiviert ist. Einige Stämme von S. aureus Sie sind positive und andere negative Lipase.

Für den Fall, dass der S. aureus Seien Sie eine positive Lipase, eine undurchsichtige Fläche wird um die schwarz oder dunkelgraue Kolonie beobachtet, und dann der klare Halo für die Wirkung der Lecithinase.

Die Kolonien von Bakterien anders als S. aureus In diesem Medium wachsen und entwickeln farbenlose oder braune Kolonien, ohne Halo herum.

Sie können auch atypische schwarze Kolonien mit oder ohne farblose Kante beobachten, jedoch ohne helle Halo. Diese Kolonien sollten nicht berücksichtigt werden, sie entsprechen nicht dem S. aureus.

Vorbereitung

Eigelbemulsion

Ein kühles Hühnerei wird genommen, wanderte gut und platzierte 2 bis 3 Stunden in 70% Alkohol. Dann trennt das Ei aseptisch und sorgfältig das Hell des Eigelbs. Anschließend werden 50 ml des Eigelbs eingenommen und mit 50 ml sterile physiologische Lösung gemischt.

1% P/V Kalium TellTo

Einige Handelshäuser verkaufen 1% Poetium teluro bereit zu verwenden. Es wird dem Medium hinzugefügt, bevor sich die Mittel verfestigen.

Um diese Lösung im Labor vorzubereiten, 1.0 g Kaliumtellurit und löst sich in einem Teil des Wassers auf. Anschließend wird die Wassermenge abgeschlossen, bis es 100 ml erreicht. Die Lösung muss nach der Filtrationsmethode sterilisiert werden.

Vorbereitung des Kulturmediums

Wiegen Sie 60 g dehydriertes Medium und lösen Sie in 940 ml destilliertem Wasser. Lassen Sie die Ruhemischung ungefähr 10 bis 10 Minuten lang.

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Wärmen Sie die Umgebung häufig auf, um den Auflösungsprozess zu verbessern. Eine Minute kochen lassen. Sterilizion im Autoklav bei 121 ° C für 15 Minuten.

Stellen Sie stehen, bis es eine Temperatur von 45 ° C erreicht und 50 ml Eigelbemulsion und 10 ml 1% Telurit hinzufügen. Gut mischen und zwischen 15 und 20 ml auf Petrisch -Sterilplatten servieren.

Verfestigen lassen, in Platten umgekehrt bestellen und bis zur Verwendung im Kühlschrank sparen.

Der endgültige pH des vorbereiteten Mediums muss 6,8 ± 0,2 betragen.

Bevor Sie eine Probe säen, sollten Sie warten, bis die Platte die Temperatur der Umgebung übernimmt. Säen Sie die Plaques aufgrund von String oder Oberfläche mit Drigalski Spatel.

Die Farbe des dehydrierten Mediums ist geröstet und die Farbe des vorbereiteten Mediums ist hellbernnd.

Verwenden

Klinische Proben

Klinische Proben werden direkt gesät, indem sie einen Teil des Materials an einem Ende der Platte entladen, und von dort stachen sie aufgrund von Erschöpfung auf. 24 bis 48 Stunden bei 35-37 ° C inkubieren.

Lebensmittelproben

Wiegen Sie 10 g der Lebensmittelprobe und homogenisieren Sie in 90 ml 0,1%Peptonada Wasser, von dort aus bereiten sie bei Bedarf Verdünnungen vor. Inokulieren Sie die Plaques dreier mit 0,3 ml der vorbereiteten Lösungen und säen. Es handelt sich um 24 bis 48 Stunden bei 35-37 ° C.

Diese Methodik ermöglicht es Ihnen, die typischen Kolonien zu zählen und ist ideal, wenn das Vorhandensein von S. aureus Über 10 UFC pro Gr/ml Probe.

Wenn vermutet wird, dass der Betrag von S. aureus Es ist klein oder es gibt eine Menge begleitender Flora, es wird vorgeschlagen, dass es vorgeschlagen wird. Dies wird das Wachstum von bevorzugen S. aureus und hemmen die Entwicklung der dazugehörigen Flora. Die Tuf -Röhren werden in Baird Parker Agar gesät.

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Wasserproben

In einem Vakuum- und sterilisierten Filtrationssystem werden 100 ml Wasser gefiltert, und dann werden die mikroporöse Membran von 0,4 Mikrometern mit einer sterilen Klemme entfernt und auf eine Baird Parker -Platte gelegt. Es handelt sich um 24 bis 48 Stunden bei 35-37 ° C. Diese Technik ermöglicht es den typischen Kolonien, darauf zu zählen S. aureus.

QA

Um die Qualität des Baird Parker -Agars zu bewerten, können bekannte Stämme verwendet werden, wie z Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Im Fall von Stämmen von S. aureus Es ist bekannt, dass ATCC Telurit reduziert und eine positive Lipase und Lecithinase ist. Daher muss es eine zufriedenstellende Entwicklung geben und konvexe Kolonien mit schwarzem Zentrum und farbloser Kante wachsen, mit einem undurchsichtigen Halo und einem weiteren externen Halo -klarer.

Für seinen Teil von S. Epidermidis In diesem Medium wird eine schlechte Entwicklung erwartet, wobei graue Kolonien schwarz machten, ohne einen klaren Heiligenschein.

Für UND. coli Und P. Mirabilis Es wird erwartet, dass es vollständig oder teilweise gehemmt ist. Im Falle von braunen Kolonien ohne undurchsichtige Zone oder im klaren Halo.

Empfehlungen

-Das Medium sollte nicht erhitzt werden, nachdem sie das Telurito und Eigelb hinzugefügt haben.

-Die Herstellung der Eigelbemulsion und ihr Aggregat in der Mitte ist ein sehr gefährdeter Kontaminationsschritt. Sorgfalt muss gemacht werden.

-Wenn es ein Vorhandensein typischer Kolonien von vorhanden ist S. aureus Es muss bestätigt werden, indem ein Coagulase -Test zu diesem Stamm fährt.

-Wenn es mit Coagulase zweifelhafte Ergebnisse gibt, müssen andere Bestätigungstests montiert werden.

-Achten Sie darauf, das Vorhandensein typischer Kolonien von nicht zu verwechseln S. aureus Mit den atypischen schwarzen Kolonien.

Verweise

1. BD Laboratories. Baird Parker Agar. Verfügbar bei: BD.com
2. Labors Francisco Soria Melguizo. Baird Parker Agar. Verfügbar unter: http: // f-soria.Es ist/informiert