BHI AGAR Was ist, Foundation, Vorbereitung, verwendet

Er BHI Agar o Gehirnherzinfusion. Es ist ein nahrhaftes massives Kulturmedium. Auf Spanisch bezeichnen wir ihn als Infusion Cerebro Heart Agar. Es handelt.

Es besteht aus Gehirninfusion und Kalbs Herz, tierisch -schaukischem peptischem Hydrolyz.

Es ist zu beachten, dass BHI -Agar eines der häufigsten Kulturmedien in Bakteriologie -Labors ist. Es kann ohne Nahrungsergänzungsmittel als primäres, subjektiver Kolonien verwendet werden, die in anderen selektiven Medien oder zur Aufrechterhaltung von Stämmen im Labor erhalten werden.

Andererseits ist es ein ideales Mittel, um als Grundlage für die Herstellung angereicherter Medien wie Blutagar und Schokoladenagar verwendet zu werden. Beide Ideale für die Isolierung von anspruchsvollen Mikroorganismen aus Nährwert. Es sollte jedoch berücksichtigt werden, dass sie, da es Glukose enthält.

Ebenso kann der BHI -Agar zur Herstellung von besonderen Mitteln für die Isolierung pathogener Mikroorganismen mit schwierigem Wachstum in den gemeinsamen Medien verwendet werden, einschließlich: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diphtheriae und Histoplasma capsulatum.

Mit dem Antibiotika -Additiv wird der BHI -Agar zu einem selektiven Medium für die Pilzisolierung.

Basis

Es ist ein nahrhaftes Kulturmedium, um mäßig anspruchsvolle Mikroorganismen zu isolieren und seine Anreicherung durch Hinzufügen von Blut und anderen nahrhaften Nahrungsergänzungsmitteln zu erhöhen.

Es handelt. Es kann jedoch mit der Zugabe von Antibiotika selektiv werden.

Das Medium enthält die Infusion von Gehirn und Kalbsherz, hydrolysiertes tierisches Gewebe und hydrolysiertes Pankreas -Kaseingewebe; Alle diese Verbindungen wirken als Quellen für Vitamine, Aminosäuren, Stickstoff und Kohlenstoff.

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Glukose ist ein Kohlenhydrat, das Mikroorganismen Energie verleiht, sobald sie es fermentiert haben. Während Natriumchlorid und Dinatriumphosphat das osmotische Gleichgewicht aufrechterhalten und einen pH -Wert nahe der Neutralität liefern. Schließlich verleiht der Agar der Umwelt eine solide Konsistenz.

Vorbereitung

52 Gramm des dehydrierten Mediums wiegen und in einem Liter destilliertem Wasser auflösen. Nehmen Sie die Mischung zu einer Wärmequelle, bis sie kocht und während des Auflösungsprozesses häufig aufregt.

Sie können Keile oder BHI -Agarplatten ohne Zusatzstoffe vorbereiten.

Keile

Servieren Sie die Zubereitung zur Keilvorbereitung, bis sie die Hälfte jedes Röhrchens ausfüllen, abdecken und 15 Minuten lang in einem Autoklaven bei 121 ° C sterilisieren, wenn sie auf einer Basis ins Bett gehen. Anschließend bis zur Verwendung im Kühlschrank halten.

BHI -Keile für Bacteroteca. Quelle: Foto des MSC -Autors aufgenommen. Marielsa Gil.

Platten

Das gelöste Gemisch ist 15 Minuten bei 121 ° C autoklava, wenn es geht, dürfen es bis zu 50 ° C abkühlen und werden 20 ml des Mediums in Petri -Sterilplatten serviert. Sie dürfen sich bis sie verwendet haben. Lassen Sie die Platten vor dem Aussaat die Umgebungstemperatur einnehmen.

Der mittlere pH muss 7,4 ± 0,2 betragen.

Das unvorbereitete Medium ist beige und vorbereitet, leichter Bernstein.

Blutagar

Nach der Sterilisierung des Medium. Wenn auf der Platte Blasen gebildet werden, sollte die leichtere Flamme an den Blasen, um sie zu entfernen.

Ebenso können Spezialmedien hergestellt werden, indem die entsprechenden Zusatzstoffe hinzugefügt werden, wenn das Gemisch die Temperatur von 45 bis 50 ° C erreicht.

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Das Medium ist Kirschrot.

Anwendungen

Ohne Ergänzungen verwenden

Der BHI -Agar ohne Zusatzstoffe ist als primärer Kultivierung nützlich und reine Stämme von Mikroorganismen wenig oder mäßig anspruchsvoll für seine nachfolgende Identifizierung.

Da es sich um ein helles Farbmedium handelt, ist es ideal für die Beobachtung von Pigmenten und auch durch keine störenden Substanzen, einige biochemische Tests wie Oxidase und Katalase oder die Montage anderer biochemischer Tests aus Kolonien aus diesem Agar.

Ebenso sind BHI Agar breit.

Die von der Oberfläche mit bakteriellen Stämmen gepflanzten Platten oder Keile werden 24 bis 48 Stunden bei 37 ° C inkubiert. Während in Pilzen die Temperatur- und Inkubationszeit von der Art des gefragten Pilzes abhängt.

Als Grundagar für die Vorbereitung anderer Medien

Mit dieser Basis können Sie angereicherte und selektive Medien vorbereiten.

Angereichert

Seine Hauptfunktion ist es, als Grundlage für die Herstellung des Routine -Blutes in mikrobiologischen Labors zu dienen. Insbesondere die BHI -Basis ist der Isolation von Stämmen von förderlich Streptococcus sp. Es hat jedoch Unannehmlichkeit.

Es wird auch zur Herstellung von Kaninchen oder Pferdeblut verwendet Haemophilus sp. Für bessere Ergebnisse können Sie ein Anreicherungspräparat hinzufügen (Isavalex).

Wenn die Proben vom Atemweg zum Agar stammen, kann Bacitracin zugesetzt werden Haemophilus sp.

Andererseits können Sie Blut (Lamm oder Mensch) mit Cistina Tellurito vorbereiten, um zu isolieren Corynebacterium diphtheriae. Ebenso ist es nützlich, um Kaninchenblut vorzubereiten, wobei das Aggregat von Cistine und Glukose für die Isolierung von Francisella tularensis.

Die Aussaat von Blutagarplatten erfolgt durch Erschöpfung und inkubiert bei 35-37 ° C für 24-48 Stunden bei Mikroaerophilie (5-10% der CO₂).

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Selektiv

Dieses Medium mit dem Aggregat von Antibiotika kann den Sabouraud -Agar für Pilzisolierung ersetzen.

Der BHI -Agar in Kombination mit Chloramphenicol - Gentamycin oder Penicillin -, Streptomycin und Pferdeblut ist ideal für die Isolierung von Histoplasma capsulatum.

Abhängig vom Mikroorganismus, der die Inkubation bei 35-37 ° C oder bei Raumtemperatur bei Aerobiose isolieren soll. Manchmal ist Inkubation in beiden Temperaturbereichen erforderlich, indem 2 Platten dafür verwendet werden.

Einige Pilze mögen Trichophyton Mentagrophyten Sie müssen bis zu 7 Tage bei Raumtemperatur inkubiert werden.

QA

Von jedem vorbereiteten Grundstück wird empfohlen, eine Platte oder einen Keil bei 37 ° C für 24 Stunden zu inkubieren und zu überprüfen, ob es kein Wachstum gibt. Besonders bei der Vorbereitung von Blut ist es wichtig.

Andererseits kann die Qualität des Mediums bewertet werden.

In diesem Sinne können Sie, um BHI -Agar ohne Zusatzstoffe zu bewerten Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 o Candida albicans ATCC 10231. 37 ° C werden 24 bis 48 Stunden in der Aerobiose inkubiert. In allen Fällen wird ein zufriedenstellendes Wachstum erwartet.

Um Blutagarplatten zu bewerten, können Sie Stämme säen  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 oder Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.

Bakterielle Stämme werden 24 Stunden lang bei 37 ° C in Mikroaerophilie inkubiert, während der Pilz bei Raumtemperatur in einer feuchten Kammer bis zu 7 Tagen inkubiert. In allen Fällen wird ein zufriedenstellendes Wachstum erwartet.

Verweise

1. Britania Laboratories. Hirnherz -Infusion Agar. Erhältlich bei: Britanialab.com.
2. BD Laboratories. Agar in der Gehirnherzinfusion (BHI). Verfügbar bei: BD.com.