Biggy Agar, Vorbereitung und verwendet

Er Biggy Agar Es ist ein solides, selektives und differentiäres Kulturmedium. Es wurde entwickelt, um die Identifizierung der Hauptart von Candida zu isolieren und zu helfen. Sein Name Biggy stammt aus dem Akronym in englischer Wismut -Glucose -Glycine Yeas.

Die ursprüngliche Formel wurde von Nickerson erstellt, daher ist dieses Medium auch als Nickerson Agar bekannt. Es besteht derzeit aus Hefeextrakt, Glycin, Dextrose, Ammoniumcitrat, Wismutcitrat, Natriumsulfit und Agar.

Grafische Darstellung des Biggy -Agars. Quelle: Flickr.com

Biggy Agar wird zur Differenzierung komplexer Arten formuliert C. Albicans, c. Tropicalis, c. Krusei und c. Kefyr, Aber andere Arten wie z Candida glabrata, C. Parapsilosis, c. Guilliermondii, Trichhosporun SP, Geotrichum candidum und Saccharomyces cerevisiae.

Es hat jedoch eine gute Sensitivität und Spezifität, wenn sie es mit anderen Medien mit ähnlicher Funktion vergleicht, wird dies auf dem zweiten Platz und wird durch Chromagar überwunden. Aus diesem Grund bevorzugen viele Laboratorien letztere, obwohl es viel teurer ist.

Es sollte klar sein, dass die Verwendung des Biggy -Agar sowie der ähnlichen Mittel zu einer schnellen mutmaßlichen Identifizierung hilft, aber niemals bestätigend ist. Daher müssen zusätzliche Identifikationsmethoden verfügbar sein. Zum Beispiel Vitek 32 und API 20 Identifikationssysteme.

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Basis

Der Biggy Agar wird als teilweise selektives Medium für die Isolierung von Hefen, insbesondere der Candida -Gattung, angesehen, obwohl andere Genres wachsen können.

Es ist auch ein differentielles Medium, da in Abhängigkeit von den beteiligten Arten unterschiedliche Eigenschaften in Aspekt, Farbe, Form und Größe beobachtet werden. Es wird als chromogenes Medium für die Entwicklung verschiedener Farben in den Kolonien angesehen.

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Die von den Kolonien von Hefen vorgestellte Farbe ist auf das Vorhandensein von Wismutsulfit im Agar zurückzuführen. Nickerson erkannte, dass die Hefen der Gattung ehrlich. Dies entsteht Kolonien zwischen Licht und Schwarz.

Dieser Agar enthält Hefe- und Dextrose -Extrakt, der die Quelle von Grundnährstoffen und Energie für die Entwicklung von Hefen liefert. Glycin stimuliert das Wachstum von Hefen und hemmt gleichzeitig die Entwicklung bestimmter Bakterien.

In diesem Sinne wirken Ammonium und Wismut -Citrat sowie Natriumsulfit als Bakterienwachstumsinhibitoren. Der Agar ist der Agent, der der Umwelt die solide Konsistenz verleiht.

Vorbereitung

45 g dehydrierter Kultur wiegen und in einem Liter destilliertem Wasser auflösen. Schütteln und erhitzen Sie die Mischung, lassen Sie sich 1 Minute auf die komplette Lösung kochen lassen. Dieses Kulturmedium ist in Autoklaven nicht sterilisiert.

Beim Abkühlen von ungefähr 45 ° C in Maria gießen Sie 20 ml auf Petrischsterilplatten.

Die Farbe des dehydrierten Mediums ist gelblich und hergestelltes Grau ist ein gelblich weißes Gel, bei dem ein leicht flockiger Niederschlag beobachtet werden kann.

Der pH -Wert muss 6,8 ± 0,2 betragen.

Das vorbereitete Medium muss im Kühlschrank (4 ° C) gelagert und vor Licht schützen. Wie ein Mittel, das nicht selbst -clava so bald wie möglich verwendet werden sollte. Die Verwendung wird empfohlen, bevor es 3 Tage seit seiner Vorbereitung trifft.

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Verwenden

Die Platten werden bei Raumtemperatur (25 ° C) bis 24, 48 und 72 Stunden inkubiert. Die Inkubationszeit kann bis zu 5 Tage verlängert werden.

Jede Candida -Art entwickelt bestimmte Merkmale, die sie voneinander unterscheiden lassen. Die Medienhersteller beschreiben die folgenden Eigenschaften für jede Art:

-Candida albicans Komplex: Es entwickelt sich in diesem Agar als glatte, runde, braune oder schwarze Kolonien mit einer leichten Myzelkante. Mit der Vorbehalt.

-Candida tropicalis: Die hellen, kleinen, dunklen hellen Kolonien mit schwarzer und heller Myzelkante. Die dunkle Farbe breitet sich in Richtung der Umwelt aus, charakteristisch, die für diese Art typisch sind, nachdem er 72 Stunden lang inkubiert wurde.

-Candida Krusei Entwickeln Sie raue, flache Kolonien mit der Kante zwischen Brown bis Negruzco.

-Candida Parakrusei: mittelgroße Kolonien, die meiste Zeit mit rauem Aussehen, flach. Die Farbe kann zwischen leuchtend dunkelrotem Kaffee bis hin zu hellem rotem Kaffee variieren. Der Rand der Kolonien hat ein umfangreiches, gelbliches Myzel.

-Candida stellelatoid: Entwickeln Sie mittlere, flache Kolonien, dunkelbraun, fast schwarz. Die Myzelentwicklung ist sehr knapp.

Eine Studie von Yücesoy und Marol im Jahr 2003 zeigte, dass das Chromagar -Medium eine bessere Empfindlichkeit und Spezifität für die Differenzierung und Identifizierung verschiedener Candida -Arten aufweist als das Biggy -Agar.

QA

Für die Sterilitätskontrolle werden Platten inkubiert, ohne bei 25 ° C und 24 bis 48 Stunden in Dunkelheit zu impft.

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Die empfohlenen ATCC -Stämme zur Durchführung mittlerer Qualitätskontrolle sind:

Candida albicans Komplex  ATCC 60193, Candida glabrata ATCC 2001, Candida Krusei ATCC 34135. In allen von ihnen wird das Wachstum wie oben beschrieben erwartet.

Sie können auch die folgenden Stämme verwenden:

Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 und Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. In den ersten beiden wird die gesamte Hemmung erwartet, aber bei teilweise wachsender Kolonien wird die creme Farbe sein.

Im Fall von S. aureus Es wird erwartet, dass es vollständig gehemmt wird, aber wenn sie teilweise wachsen, sind ihre Kolonien weiß.

Einschränkungen

Einige Bakterien können sich in diesem Medium entwickeln und können sogar dunkel werden, was einen Candida -Nachbarn simuliert.

Tabelle: Merkmale der Kolonien einiger Hefen in Biggy stimmten nach der Arbeit von zugestimmt Yücesoy M und Marol s.

Quelle: Yücesoy M, Marol s. Leistung von Chromagar Candida und Biggy Agar zur Identifizierung von Yeas -Arten. Ann Clin Antimicrob -Mikrobiol. 2003; 2 (8): 1-7

Verweise

1. Yücesoy M, Marol s. Leistung von Chromagar Candida und Biggy Agar zur Identifizierung von Yeas -Arten. Ann Clin Antimicrob -Mikrobiol. 2003; 2 (8): 1-7.
2. MCD Lab. Biggy Altern technische Datei. Erhältlich bei: MCDLAB.Netz/
3. Labor Neogen. Biggy Agar. Erhältlich bei: Foodsafety.Neogen.com
4. Conda Pronadisa Laboratorien. Biggy Agar. Erhältlich bei: Condalab.com
5. BD Laboratories. BD Biggy Agar (Wismut Glucose Glycine Yaest Agar). 2011. Verfügbar bei: BD.com