Bilis Agarc

Er . Es wird als diagnostischer Test verwendet, um die Fähigkeit eines gewissen Mikroorganismus des Wachstums in einem Medium zu bestimmen, das Galle enthält und auch das Glykosid -Skulin in Skulptin und Glukose zersetzt.

Dieser diagnostische Test wird verwendet, um Spezies von der Gattung Streptococcus zur Gruppe D (positive Skulptale) zu unterscheiden, von anderen Streptococcus -Gruppen, die negativ vor diesem Test reagieren.

BILIS BILIS -Platte, sembriert mit einem Enterococcus -Stamm (positiver Test). Quelle: Kein maschinenlesbarer Autor zur Verfügung gestellt. Philippinjl nahm an (basierend auf Urheberrechtsansprüchen). [Public Domain]

Es ist zu beachten.

Andererseits ist die mittlere Galle auch für die Diagnose von nützlich oder Arten von, Da diese Mikroorganismen eine positive Skulptions Galle sind.

Der Agar -Agar der Skulpta besteht aus Pepton, Fleischextrakt, Ochsen Galle, Skulptur, Eisencitrat, Agar und destilliertem Wasser. Einige Handelshäuser umfassen Natriumazida innerhalb der Zusammensetzung des Mediums.

Das Medium kann im Labor hergestellt werden, wenn Sie alle Verbindungen getrennt haben oder aus der kommerziellen dehydrierten Umgebung hergestellt werden können.

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Basis

Das Skulptonmedium enthält Peptones und Fleischextrakt, beide Verbindungen bieten die notwendigen Ernährungssubstanzen für das Wachstum von Mikroorganismen.

Es enthält auch Sculline; Diese Verbindung ist eine Glucóside, die durch die Vereinigung eines einfachen Monosaccharids (Glucose) mit einer Verbindung namens 6.7-dihydroxymarin oder Scupply (Agluconon) zusammen mit einer acetalen oder glucosidischen Bindung gebildet wird.

Der Test basiert darauf, zu demonstrieren, ob die Bakterien hydrolysieren können. In diesem Fall wird die Skulptur in SCUPs und Glukose unterteilt. Sculetin reagiert mit Eisen in der Mitte und bildet eine dunkelbraune, fast schwarze Verbindung.

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Dies bedeutet, dass Eisen Citrat als Reaktionsentwickler fungieren. Diese Funktion macht die Bildhauerei Agar zu einem Differentialmedium.

Andererseits ist Galle ein Inhibitor, der das Wachstum einiger Mikroorganismen verhindert. Daher muss Bakterien vor der Entfaltung von Skulline in Gegenwart von Galle wachsen können können. Daher wird dieses Medium als selektiv angesehen.

Die Bakterien, die sich in dieser Umgebung entwickeln können, sind hauptsächlich diejenigen, die in der Darmumgebung leben.

In diesem Sinne tragen einige kommerzielle Häuser zum Natrium -Azid -Medium bei, um zusätzlich das Wachstum von Gram -negativen Bazillen zu hemmen, was die Selektivität des Mediums für das Wachstum von Streptococcus erhöht.

Schließlich verleiht der Agar die Umwelt fest und das Wasser ist das Lösungsmittel der Verbindungen.

Vorbereitung

Hausgemachte Gallenskulpturvorbereitung

Wiegen:

5 g Peptones

3 g Fleischextrakt

40 g Ochsengallen

1 g Skulptur

0,5 g Eisencitrat

15 g Agar

1000 ml destilliertes Wasser

Im Falle einer Addition von Natriumazid.

Lösen Sie die Komponenten im Liter destilliertem Wasser, Wärme, bis sich die Verbindungen in ihrer Gesamtheit auflösen. 5 ml in Reagenzgläser mit 16 x 125 mm Fadendeckel verteilen. Autoklavar bei 121 ° C, 15 Pfund für 15 Minuten.

Aus dem Autoklav nehmen und die Röhrchen auf einer Stütze neigen.

Bis zum Gebrauch im Kühlschrank aufbewahren. Vor dem Aussaat bei Raumtemperatur bringen.

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Sie können auch Gallengallenskulpturenplatten vorbereiten. In diesem Fall ist die gesamte Mischung Autoklava in einer Felola und anschließend in Petrisch -Sterilplatten verteilt. Sie lassen sich selbst verfestigen und im Kühlschrank behalten.

Der mittlere pH muss 6 sein.6 ± 0,2.

Vorbereitung der Bilis Agulina aus einem kommerziellen Medium

Wiegen Sie die vom Einsatz angegebene Menge. Dies kann von einem Handelshaus zu einem anderen variieren. Geben Sie anschließend gleich dem oben erläuterten Verfahren fort.

Der mittlere pH muss 6,6 ± 0,2 betragen. Die Farbe des dehydrierten Medium.

Handelsbildung halber Galle. Quelle: Foto des MSC -Autors aufgenommen. Marielsa Gil.

Anwendungen

Das skulptische Medium wird hauptsächlich verwendet, um den Streptokokken der Gruppe D (positive Skulptur Galle) vom Rest der Streptococcus -Gruppen (negative Skulptur Galle) zu differenzieren.

Wenn der Wachstumstest mit dem Test der Skulptalle in hypersierte Brühe kombiniert wird.

Diese spezielle Streptococcus -Gruppe gehört zur Gruppe D des genannten Genres und ist in der Lage, 6,5%Natrium zu hydrolyzieren), die den Unterschied ausmacht.

Daher der Streptokokken, der hydrolyz ist.

Gesät

Inokulieren Sie das Medium vorzugsweise aus einer 24-Stunden-reinen Brühe Todd-Hewitt.

Fügen Sie 2 Tropfen auf der mittleren Oberfläche mit einer Pasteurpipette hinzu und strecken Sie sich in der Mitte mit einem Platingriff aus.

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48 Stunden bei 35 ° C inkubieren, während die Inkubationszeit erfüllt ist, kann sie überwacht werden, um festzustellen, ob es eine positive Reaktion gibt. Wenn am Ende der Zeit die Reaktion negativ bleibt, kann bis zu 72 Stunden inkubiert werden.

Deutung

Positive Reaktion: Aussehen einer dunkelbraunen Farbe, fast schwarz im Flötespeak (im Fall des Röhrentests) oder schwärzend des Agars um die Kolonien (im Fall des Plattentests).

Negative Reaktion: Es gibt keine Schwärze des Mediums oder das Aussehen schwarzer Farbe in weniger als der Hälfte des Röhrchen. Andererseits sollte das Bakterienwachstum in der Mitte ohne das Erscheinen schwarzer Farbe als negativer Test angesehen werden.

QA

Bewertung der Qualität des Mediums, eines Stammes von Enterococcus faecalis ATCC 29212 als positive Kontrolle und ein Streptocococus -Stamm, der nicht zur Gruppe D als negative Kontrolle gehört.

Einschränkungen

-Die Medien, die Natriumazid nicht enthalten. Einige von ihnen können das Medium blicken.

- Einige kommerzielle Häuser fügen eine geringe Gallenkonzentration hinzu (10%), und aus diesem Grund können sich einige Streptokokken, die nicht zur Gruppe D gehören.

Verweise

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