Schokoladenagar

Yersinia pestis Bakterien auf einer Schokoladenagar -Plaque. Quelle: Department of Health and Human Services, Wikimedia Commons

Was ist Schokoladenagar?

Er Schokoladenagar Es ist ein Mittel zur soliden, angereicherten, nicht -selektiven und nicht unterschiedlichen Kultur. Es wird hauptsächlich für die Isolierung von anspruchsvollen Mikroorganismen aus dem Nährstoffstand verwendet, obwohl jede Art von Bakterien darin wachsen kann.

Deshalb nimmt sein Nutzen insbesondere in der Proben der Probenahme zu, die normalerweise steril sind, wie CSF und Gelenkflüssigkeit. Obwohl es auch in den Medien enthalten ist, die für die Pflanzung polymikrobieller Proben ausgewählt wurden, ist es jedoch in diesen Fällen erforderlich, Antibiotika hinzuzufügen, die die gleichzeitige Flora hemmen.

Dieses Medium hat eine charakteristische braune Farbe, die der Schokolade sehr ähnlich ist, daher der Name. Die Herstellung ist dem des Blutagars sehr ähnlich, nur in diesem Fall muss das Blut erhitzt werden, damit die roten Blutkörperchen brechen.

Seine Präparation ist wie Blutagar sehr empfindlich, da es leicht verunnetbar ist. Daher bevorzugen viele Labors, dieses bereits von Handelshäusern erstellte Medium zu erwerben, die ihre Qualität garantieren.

Basis

Es besteht aus einer nährstoffreichen Agarbasis und einem erhitzten Blut. Die Hämolyse der roten Blutkörperchen liefert den Mediumfaktor X (Hemina) und Faktor V (NAD), der für das Wachstum einiger Mikroorganismen wie Geschlecht erforderlich ist Haemophilus. Es ist auch sehr nützlich zu isolieren Neisserias sp.

Wie Blutagar können unterschiedliche Medien je nach Bedarf als Basisagentur verwendet werden. Unter den verwendeten Medien befinden sich Infusion Cerebro Heart und Crush Sojabohnen, obwohl die am meisten empfohlenen Columbia Agar, Müeller Hinton, GC Agar und Thayer Martin Agar sind.

Kann Ihnen dienen: Einfache Diffusion: Prozess und Beispiele

Einige Schokoladenagarvarianten umfassen eine angereicherte Ergänzung, die im Handel erhältlich ist, isovexex oder polyvitex.

Diese Nahrungsergänzungsmittel enthalten Vitamin B₁₂, L-Glutamin, Adenin, Guaninhydrochlorid, P-Aminobenzoesäure, Nikotinamid Adenin Dinukleotid (NAD), Thiamin-Pyrophosphat, Eisen-Nitrat, Thiaminhydrochlorid, Cystein-Hydrochlorid, L-Cistin und Glucose.

Es ist wichtig hervorzuheben, dass Schokoladenagar angereicherer als Blutagar ist, aber keine Hämolysemuster zulässt.

Anwendungen

• Schokoladenagar mit Columbia Agar: Enthält Pankreas -Kasein und Herz, verdauter Fleischpeptiker, Natriumchlorid, Agar, Hefeextrakt und Maisstärke. Darüber hinaus ist es reich an Vitaminen, Mineralien und essentiellen Aminosäuren. Diese Basis mit erhitztem Blut ist ideal, um Bakterien des Genres zu isolieren Neisseria. Andererseits, wenn eine Ergänzung hinzugefügt wird Brucella, Der oben erwähnte Mikroorganismus kann isoliert werden. Die Ergebnisse werden mit Pferdblut verbessert.
• Schokoladenagar mit GC -Basislagar (für Gonococci): Enthält Peptones, Maisstärke, monobasische und Dibasische Puffer, Natriumchlorid und Agar. Die meisten der kommerziell hergestellten Schokoladenleistungspräsentationen sind mit dieser Basis ausgestattet und enthalten kein erhitztes Blut, sondern eine synthetische Mischung aus Hemina und eine chemische Ergänzung von Wachstumsfaktoren, Vitaminen, Mineralien, Aminosäuren, Faktor V und Glukose.
• Mit Müeller Hinton Agar zubereitetes Schokoladenagar: Es wird verwendet, um den antimikrobiellen Suszeptibilitätstest für anspruchsvolle Mikroorganismen durchzuführen, wie z Streptococcus pneumoniae, Verwenden Sie 5% des erhitzten Widderbluts. Es dient auch für die primäre Isolation von Neisserien Und Haemophilus, aber im speziellen Fall der Isolation von Haemophilus Die Verwendung von Pferdeblut wird bevorzugt, weil er reich an Faktor X und V ist. Andererseits wird empfohlen, die normale Flora des Gebiets zu hemmen, wenn die zu bepflanzende Probe aus einem nicht sterilen Gebiet stammt. Beispiel: Für Atemproben, in denen das Vorhandensein von Geschlechtsbakterien vermutet wird Haemophilus Bacitracin wird verwendet, um das Wachstum von zu hemmen Staphylococcus, Mikrokokken, Streptokokken Und Neisserien Saprophyten. 
• Schokoladenagar mit Thayer Martin Agar: Es ist etwas Besonderes zu isolieren Neisseria gonorrhoeae. Es muss Antibiotika enthalten, um die dazugehörige Flora zu hemmen. Lammblut wird verwendet.

Es kann Ihnen dienen: Flora und Fauna von Zacatecas: repräsentativere Arten

Vorbereitung

Die Indikationen für die Vorbereitung des Basiseragars, der verwendet wird, müssen gesehen werden. Im Allgemeinen beschreiben sie, wie viel Sie wiegen sollten, um einen Liter Kulturmedium vorzubereiten. Im Labor können Sie die erforderliche genaue Menge vorbereiten, die mehr oder weniger als ein Liter sein kann.

Berechnungen

Eine dreiköpfige Regel wird erstellt, um zu berechnen, wie viel Sie wiegen müssen, um das gewünschte Volumen vorzubereiten. Beispiel:

Wenn es 1 Liter notwendig ist, 40 g zu wiegen, und das Labor 800 ml benötigt, heißt es:

1000 ml -40 gr

800 ml - x

Die Formel wird wie folgt sein:

X = 32 g (Größe trotz 800 ml).

Wiegen und auflösen

Die notwendige Menge wird gewogen und in eine Felola mit dem Wasser gelegt.

Es erwärmt sich über mittelschwer.

Sterilisieren

Das Fixola wird in den Autoklav eingeführt, um das Medium bei 121 ° C 20 Minuten lang zu sterilisieren.

Blutaggregat

Beim Verlassen des Autoklaven dürfen er stehen, bis die Temperatur des Mediums ungefähr zwischen 56 und 70 ° C liegt, um das Blut zu platzieren und zu mischen, bis das Medium braune Farbe wird.

Wenn Nahrungsergänzungsmittel hinzugefügt werden, ist dies der Zeitpunkt dazu. Anschließend mischen und servieren Sie 20 ml für jede sterile Petrischplatte.

Das gesamte Verfahren muss in einer laminaren Flussglocke oder um das Bunsen -Feuerzeug durchgeführt werden. Lassen Sie stehen, bis sie in einem Kühlschrank umgekehrt werden und sparen.

Eine andere Möglichkeit, Schokoladenagar ohne Blut vorzubereiten

Das Basenmedium wird wie oben beschrieben hergestellt, dehydratisiertes Hämoglobin, das kommerziell erhalten wurde und im Autoklav sterilisiert wird.

Kann Ihnen dienen: Hämoolinfa

Beide Lösungen dürfen bei 50 ° C abkühlen, die Ergänzung ist verbunden und hinzugefügt. Unter aseptischen Bedingungen mischen und dann in Petrisch -Sterilplatten servieren.

QA

Es ist wichtig, dass das Blut bei der angegebenen Temperatur platziert wird, da es das Ideal ist, um die roten Blutkörperchen zu likt.

Sie sollten keine Blasen auf der Oberfläche des Agars sein. Von jeder Charge von 100 Platten muss ein oder zwei Platten 24 Stunden lang im Herd bei 37 ° C inkubiert werden, um die Sterilität zu überprüfen.

Für bessere Ergebnisse muss kurz nach seiner Vorbereitung ein Schokoladenagar verwendet werden.

Bakterienstämme kontrollieren im Labor, um die Wirksamkeit der Umwelt für das Wachstum der wichtigsten anspruchsvollen Mikroorganismen von klinischer Bedeutung zu bewerten.

Verweise

1. Garcia, p., Wände, f., Fernández del Barrio, m. Praktische klinische Mikrobiologie. Cadiz University. UCA Publications Service.
2. Schokoladenagar. Abgerufen von.Wikipedia.Org.