Agar geklebt

Corynebacterium Stratum auf Cled Agar. Quelle: Nathan Reading aus Halesowen, Großbritannien, CC von 2.0, Wikimedia Commons

Was ist der Klemmagar??

Er Agar geklebt (Cistin-Lactose-Elektrolyte-effizient) ist ein differentielles Festkulturmittel, das für die Diagnose von Harnwegsinfektionen verwendet wird. Die Zusammensetzung des Kulturmediums ist für das gute Wachstum von Urinkrankheitserregern ausgelegt und ist ideal für die Quantifizierung von Dickdarmbildungseinheiten (UFC).

Das Cled Culture -Medium ist nicht -selektiv, da gram -negative und grampositive Mikroorganismen darin wachsen können. Dies ist jedoch kein Problem, da die meisten Harninfektionen durch eine einzelne Art von Mikroorganismus verursacht werden.

Bei polymikrobiellen Infektionen können 2 oder 3 verschiedene Bakterien erreicht werden, aber es ist sehr selten, und die meiste Zeit sind sie kontaminierte Proben.

Unter den gramnegativen Bakterien, die in diesem Medium wachsen können, befinden sich die Bazillen zur Familie Enterobacteriaceae und anderen enterischen Bazillen, die die am häufigsten isolierten Uroopathogene in Urinproben im Folgenden sind: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus Mirabilis, Morganella Morganii, Pseudomonas aeruginosa, unter anderen.

Auch unter den grampositiven Bakterien, die in diesem Medium wachsen können Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophytisch, Enterococcus faecalis, Streptococcus agalactiae, Chorynebacterium SP, Lactobacillus sp Und sie können sogar Hefen wie komplex wachsen Candida albicans.

Aufgrund der chemischen Umweltzusammensetzung erlaubt es jedoch nicht das Wachstum einiger anspruchsvoller Genitourinärpathogene, wie z Neisseria gonorrhoeae, Gardnerella Vaginalis, unter anderen.

Fundament des Klemmagars

Das Kulturmedium mit Kultur hat als Quelle für Energieextrakt aus Fleisch, hydrolysiertem Kasein und hydrolysierter Gelatinehydrolyz. Sie bieten Nährstoffe für die Entwicklung wenig anspruchsvoller Bakterien.

Es enthält auch Cystin, eine Aminosäure, die das Wachstum von Coliformen ermöglicht, die durch ihre geringe Größe unterscheidbar ist.

Kann Ihnen dienen: Virulenzfaktoren

Es enthält auch als fermentierbar.

Fermentierende Bakterien drehen den mittleren pH -Wert durch Säureproduktion, entwickeln gelbe Kolonien, während nicht -fermentierende Bakterien keine Veränderungen im Medium erzeugen.

Die Fermentationsreaktion wird dank des Vorhandenseins des pH -Indikators enthüllt, der in diesem Medium Bromotimolblau ist.

Andererseits hemmt die geringe Konzentration von Mediumelektrolyten das typische invasive Wachstum der Gattung Proteus, Bezeichnung als Schwarmeffekt. Dies erzeugt einen Vorteil in Bezug auf andere Medien, da die Zählung der UFC ermöglicht, einschließlich des vorhandenen Geschlechts Proteus.

Die Konzentration mit niedrigem Elektrolyt hemmt jedoch das Wachstum einiger Arten der Gattung Shigella, Dies ist ein Nachteil in Bezug auf andere Medien.

Grundlage des Cled Agar (Bevis)

Es gibt eine Variante oder Modifikation dieses Mediums von Bevis, der die ursprüngliche Säure -Fuchsin -Zusammensetzung (Andrade) integriert hat. Das gleiche wirkt zusammen mit Bromotimolblau, um die fermentierenden Bakterien von Nicht -Fermentierung zu unterscheiden.

Der Unterschied zwischen der konventionellen und der modifizierten Umgebung ist die Farbe, die die Kolonien anwenden. Im Falle von laktose fermentierenden Bakterien erwerben die Kolonien eine rötliche orangefarben.

Anwendungen

Cled Agar wird verwendet ausschließlich Für Urinproben Proben. Die Verwendung dieses Mediums ist besonders häufig in europäischen Labors, während es in Amerika weniger verwendet wird.

Kann Ihnen dienen: Amensalismus: Merkmale, Beispiele, Unterschiede mit dem Dinererismus

Die Sammlung der Probe muss bestimmte Parameter erfüllen, um zuverlässige Ergebnisse zu erzielen, einschließlich:

Nicht vor der Probe Antibiotika einnehmen.

Nehmen Sie vorzugsweise den Urin der ersten Stunde des Morgens, da er konzentrierter ist, wenn es nicht möglich ist, eine Probe nach invasiven Methoden zu nehmen.

Waschen Sie die Genitalien gut, bevor Sie die Probe nehmen.

Verwerfen Sie den ersten Jet des Urinierens und platzieren Sie dann den Behälter.

Sammeln Sie zwischen 25 und 30 ml Urin in einem gut markierten sterilen Behälter.

Nehmen Sie sofort das Labor, das auf Eis umgeben ist.

Es muss vor 2 Stunden ausgestellt oder gekühlt bei 4 ° C maximal 24 Stunden.

Urinproben

Die Urinprobe muss 1:50 verdünnt werden.

Für die Verdünnung, Colloqar 0,5 ml Patientenurin und Verdünnung mit 24,5 ml sterile physiologische Lösung. Messen Sie 0,1 ml des Urins verdünnt und säen Sie sie durch Oberfläche mit Drigalski -Spatel auf dem CLED -Medium.

Dies ist die angegebene Aussagenmethode, um Kolonien zu zählen. Deshalb wird es in Urinproben verwendet, da die Ergebnisse in UFC/ml ausgedrückt werden müssen.

Für die Quantifizierung der erhaltenen Kolonien gehen Sie wie folgt vor: Zählen Sie die Kolonien der Platte und multiplizieren Sie sie mit 10 und dann mit 50. Dies ist die Menge an UFC/ml Urin.

Deutung

Einheiten über 100.000 UFC/ml -Indica -Harninfektion.

Auf 1000 UFC/ml- gibt es keine Infektion.

Zwischen 1000-10.000 UFC/ml -Dudoso, mögliche Kontamination, Wiederholungsprobe.

AUSWEIS

Ein Gramm sollte an die in CLED angewachsenen Kolonien gemacht werden.

Kann Ihnen dienen: Katalase: Eigenschaften, Struktur, Funktionen, Pathologien

Wenn es sich beispielsweise um einen gramnegativen Bacillus handelt, wird er auf einem MacConkey -Agar gesät, in dem die Fermentation oder nicht von Laktose bestätigt wird. Darüber hinaus wird ein nahrhafter Agar angeschlossen, um den Oxidase -Test durchzuführen.

Für den Fall, dass Gramm Gram -positive Kokosnüsse enthüllt, kann es einem salzigen Mannit -Agar und nahrhaften Agar unterliegen. In letzterem wird der Katalasetest durchgeführt. Wenn Hefen beobachtet werden, wird es schließlich auf einem Sabouraud -Agar gesät.

Viele Laboratorien ignorieren die Verwendung des mittelschweren mittelschweren und bevorzugen nur, nur Blut, MacConkey und nahrhafte Agar zu verwenden, um Urinproben zu säen.

Vorbereitung

In einer Felola mit einem Liter destilliertem Wasser 36,2 g CLED -Pulveragar auflösen. Nach 5 Minuten Ruhe den wiederbelebten Agar erhitzen und ständig mischen, bis er 1 Minute lang kocht.

Dann 15 Minuten bei 121 ° C im Autoklav sterilisieren. Abgeschlossene Zeit, ziehen Sie sich vom Autoklav zurück und lassen Sie abkühlen, bis eine Temperatur von 45 ° C erreicht ist. Anschließend wird es zwischen 15 und 20 ml auf jeder sterilen Petri serviert.

Die mit den Platten servierten Verfahren müssen in einer laminaren Flussglocke oder vor Bunsens Feuerzeug durchgeführt werden, um eine Kontamination zu vermeiden.

Die servierten Platten dürfen sich verfestigen, in umgekehrter Form bestellen und in einem Kühlschrank (2-8 ° C) bis zur Verwendung gespeichert werden.

Der endgültige pH des vorbereiteten Mediums muss bei 7,3 ± 0,2 liegen.

Verweise

1. Empfehlungen für die mikrobiologische Diagnose einer Harninfektion. Chil. Infectol. Von Scielo geborgen.Org.
2. Halb geklebt. Von Britanialab geborgen.com.