Maismehl. Fundament, Vorbereitung und Verwendung

Er Maismehl Agar Es ist eine solide Kulturmedium, niedrige Ernährungskraft, die für das subkulturelle nützlich ist Candida albicans. Auf Englisch ist es als Maismehl -Agar bekannt.

Das mittelgroße herkömmliche Maismehl hat eine sehr einfache Zusammensetzung, enthält Maismehl, Agar und Wasser. Aufgrund seines niedrigen Nährwerts ist es ideal, es bei der Aufrechterhaltung von Pilzstämmen für mäßige Zeiträume, insbesondere schwarze Pilze, zu verwenden.

ZU. Grafische Darstellung des Candida albicans -Komplexes im Maismehl -Agar -Agar. B. Clamidosporas der Candida albicans -Komplex -Sicht auf das Mikroskop, das in Maismehl gebildet wird. Quelle: a. Grahamcolm [CC BY-SA 3.0 (https: // creativecommons.Org/lizenzen/by-sa/3.0)]/ b. Von: CDC/Dr. William Kaplan, mit freundlicher Genehmigung: Bildbibliothek für öffentliche Gesundheit.

Komplexe Sporulation Candida albicans Es wird in diesem Medium bevorzugt, wenn 1% von Tween 80 während der Vorbereitung des Agar hinzugefügt werden. Die Bildung von Clamidosporen ist für diese Art charakteristisch und praktisch nur die einzige, die den Menschen betrifft.

Es gibt andere Arten, die Clamidosporen bilden, aber es ist unwahrscheinlich, dass sie den Menschen betreffen, wie z Candida Australis, vorhanden in der Exkremente von Pinguinen oder C. Clausenii, Das ist ein Saprophyt, der selten gefunden wurde. Außerdem außergewöhnlich die Spezies C. Stellatoid Und C. Tropicalis Sie könnten sie bilden.

Andererseits begünstigt die Zugabe von Glukose zu dem mittleren Maismehl die Bildung von Pigmenten in Stämmen von Trichophytom rubrum.

Es ist wichtig zu hervorheben, dass es Pilze gibt, die weder Hyphaiifs noch Pseudohifas im Anfall Maismehl wie z Cryptococcus Neoformans, Unterscheidung von anderen Genres.

Maismehl -Agar kann sich im Labor vorbereiten oder kommerzielle Medien können auch verwendet werden.

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Basis

Maismehl ist Substrat, Agar ist das erstickende Mittel und Wasser ist das Lösungsmittel.

Maismehl -Agar kann mit Tween 80 (Polyester 80 Sorbitita -Monoolat oder Polysorbat) ergänzt werden. Diese Verbindung verringert die Oberflächenspannung der Umgebung durch ihre Emulgatorkraft.

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Es schafft auch eine feindliche Atmosphäre, die übertriebene Zellmultiplikation hemmt und das Wachstum von Hyphen stimuliert und auch die Produktion von Clamidosporen begünstigt. Letzteres betrachtete Widerstandsstrukturen. Diese Struktur hilft bei der Identifizierung der Arten von Candida albicans.

Glukose in diesem Medium erhöht die Pigmentbildung einiger Pilze.

Es ist zu beachten, dass das mittlere Maismehl mit Glukose nicht die Demonstration von Clamidosporen in C erfülltOmplejo Candida albicans.

Vorbereitung

Hausgemachter Maismehl Apar

Wiegen Sie 47 g gelbes Maismehl und löst sich in 500 ml destilliertem Wasser auf. Wärme auf 60 ° C, während die Vorbereitung in einer ungefähr 1 Stunde lang aufgeregt ist. Dann filtern.

Vervollständigen Sie das Volumen bei 1000 ml mit destilliertem Wasser. Fügen Sie 17 g Agar-Wasser hinzu, Wärme zum Auflösen. Autoklavar für 15 Minuten bei 121 ° C.

In Petrisch -Sterilplatten servieren. In einem Kühlschrank sparen.

Die Farbe des vorbereiteten Mediums ist weißlich mit klumpiger Aussehen.

Wenn Sie Maismehl mit Glukose zu der oben beschriebenen Zubereitung vorbereiten möchten, um 10 g Glukose hinzuzufügen.

Kommerzieller Maismehl Agar

Wiegen Sie 17 g des dehydrierten Mediums und löst sich in 1 Liter destilliertem Wasser auf. Die Mischung kann erhitzt werden und sanft rührt, um sich vollständig aufzulösen. Im Autoklav bei 121 ° C, 15 lb, 15 Minuten lang sterilisieren.

Petrisch -Sterilplatten eingießen. Verfestigen lassen. Investieren und sparen Sie im Kühlschrank bis zur Verwendung. Temperament vor dem Gebrauch.

Der pH -Wert muss 6,0 ± 0,2 bis 25 ° C betragen.

Maismehl Agar mit Tween 80

Um den ISO 18416 -Standard einzuhalten, muss der Maismehl -Agar wie folgt vorbereitet werden:

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Wiegen Sie 65 g pro Liter und fügen Sie 10 ml Tween 80 hinzu. Wärme und Kochen für einige Minuten, bis Sie sich lösen. 15 Minuten bei 121 ºC sterilisieren.

Maismehlagar mit Glukose

Verbesserung der chromogenen Kraft der Kolonien von Trichophyton rubrum und unterscheiden sie von T. Mentagrophyten, 0,2% Glukose zur ursprünglichen Formel können hinzugefügt werden. Es muss keine Tween 80 haben, da Glukose die Bildung von Clamidosporen hemmt.

Verwenden

Hauptsächlich ist die Verwendung von Maismehlagar für die Untersuchung von Candida -Stämmen vorgesehen und hilft der Identifizierung durch die charakteristische Beobachtung von Chloidosporen bei den Albicans -Spezies. Das heißt, die Verwendung dieses Agars dient als Hilfsmethode zur Identifizierung dieser Hefen.

In diesem Agar können sowohl saprophytische als auch pathogene Arten entwickelt, aber jede bildende charakteristische Myzelstrukturen. Zum Beispiel produzieren Arten der Gattung Torulopsis kein Myzel und reproduzieren nur durch Blastokonidien.

Ebenso produzieren Trichhosporon- und Geotrichum -Arten Arthrokonidie im Maismehl, und manchmal ist es schwierig, zwischen dem und dem anderen zu unterscheiden.

Genotrichums Arthrokonidie erzeugt eine Erweiterung der Hyphen, die einem Hockeystab ähnelt.

Auch die Pigmentproduktion unter Verwendung von Glukose -Supplementierter Maismehl -Agar ist bei der Identifizierung von nützlich Trichophytom rubrum.

Gesät

Im Agar Mehl Mehl durch die verdächtigen Kolonien von offener. Das Medium wird für 24 bis 48 Stunden bei 22 ° C gesät und inkubiert. Die Inkubationszeit kann bei Bedarf verlängert werden.

Demonstration von Clamidosporen

Zu diesem Zweck muss der Maismehl -Agar mit Tween 80 mit der Dalmau -Technik geimpft werden. Diese Methode besteht darin, mit dem Platin -Griff einen Teil der verdächtigen Kolonie zu nehmen und drei parallele Schnitte in der Mitte vorzunehmen, um den Griff bei 45º zu halten. Die Schnitte müssen in einem Abstand von 1 cm zwischen dem und dem anderen getrennt werden.

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Anschließend wird ein zuvor fließendes Objekt über den gesätten Dehnungsstreifen platziert, so dass die bedeckte Hälfte und die andere entdeckt wurden.

Inkubieren Sie die Platten, die 48-72 Stunden bei 30 ° C gepflanzt wurden, und untersuchen dann das Mikroskop durch die Abdeckungen.

Aufrechterhaltung von Pilzstämmen

Für die Aufrechterhaltung der Stämme werden die gepflanzten Plaques und die Überschwemmungen im Kühlschrank (4 bis 8 ° C) gelagert. Auf diese Weise können sie mehrere Wochen dauern und für Lehr- oder Forschungszwecke verwendet werden.

QA

Für die Sterilitätskontrolle wird eine Platte ohne Impfung bei Raumtemperatur inkubiert, es wird erwartet, dass es kein Wachstum oder keine Farbänderung gibt.

Für die Qualitätskontrolle können Sie bekannte Stämme säen, wie z. B.: Staphylococcus aureus, ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.

Die erwarteten Ergebnisse sind eine teilweise Hemmung für S. aureus Und UND. coli. Während ein zufriedenstellendes Wachstum im Rest der Stämme erwartet wird.

Aspergillus niger Es wächst mit schwarzen Kolonien und sporuliert in einer ungefähren Zeit von 5 Tagen Inkubation.

Candida albicans Leveaduriform -Kolonien mit Clamidosporenproduktion.

Saccharomyces cerevisiae produzieren große Hefezellen.

Einschränkungen

Am Boden der Platte wird ein gelber Niederschlag gebildet, der nicht mit Kolonien verwechselt werden sollte.

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