Heektoen Foundation, Vorbereitung und verwendet

Er HAKTOEN AGAR o Agar Heektoen enteric ist ein solides, selektives und differentiales Kulturmedium. Es wurde am Heektoen Institute von King and Metzger zur Isolierung von Enteropathogen -Bakterien der Shigella- und Salmonellen -Genres erstellt.

Das Medium besteht aus Peptonprotein, Hefeextrakt, Gallensalzen, Lactose, Saccrose, Salicin, Natriumthiosulfat, Natriumchlorid, Eisencitrat, Ammoniumcitrat, Bromool -Blau, Säurefuchsin sowie Agar und Agar. Diese Formulierung ermöglicht es, die Shigella- und Salmonellen -Genres vom Rest der Bakterien zu differenzieren, die in diesem Medium wachsen können.

ZU. Heektoen virgen b Ague B. HAKTOEN Agar gesät. Quelle: Flickr.com/der ursprüngliche Uploader war Philippinjl in französischer Wikipedia. [CC BY-SA 2.0 FR (https: // creativecommons.Org/lizenzen/by-sa/2.0/fr/Tat.In)]

Obwohl es andere Medien mit der gleichen Funktion wie Heektoen Agar gibt, hat dies einen größeren Vorteil gegenüber anderen Medien, insbesondere wenn sie Arten von Shigella wiederherstellen wollen.

Die Arten beider Gattungen produzieren schwere Magen -Darm -Probleme beim Menschen aufgrund des Verzehrs kontaminierter Lebensmittel; Daher ist die Übertragung fäkal - oral. Deshalb wird die Verwendung von Heektoen -Agar hauptsächlich in der mikrobiologischen Analyse von Kot und Lebensmittelproben angegeben.

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Basis

HeKtoen Agar enthält Peptons und Hefeextrakt als Nährstoffquelle, die die wesentlichen Elemente für die mikrobielle Entwicklung liefert.

Es hat jedoch auch Gallensalze, die das Wachstum einiger Bakterien hemmen, insbesondere Gram -positiv und einige Gramm negativ. Aus diesem Grund wird es als selektives Medium angesehen.

Auf der anderen Seite ist Heektoen Agar ein Differentialmedium. Diese Eigenschaft wird durch das Vorhandensein fermentierbarer Kohlenhydrate wie Lactose, Zeichnung und Salicyin neben dem pH -Indikatorsystem, dargestellt durch Bromotimolblau und Säurefuchsin, vertreten.

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Alle Bakterien, die in diesem Medium wachsen können, die nicht zur Gattung Salmonella gehören, und Shigella entwickeln Lachs- oder orangefarbene Kolonien mit Ausnahme der Gattung Proteus. Dies ist auf die Fermentation eines oder mehrerer der vorhandenen Kohlenhydrate zurückzuführen, was das Medium sauer macht, wodurch der pH -Indikator dreht.

Andererseits können die Gattung Shigella und Salmonella keine der vorhandenen Kohlenhydrate fermentieren, wobei nur Peptons als Energiequelle verwendet werden, die das Medium alkalisieren und daher ihre Kolonien grün blau sind.

Auch in diesem Medium können Bakterien in diesem Medium Wasserstoffsulfid (farbloses Gas) bilden können. Natriumthiosulfat wirkt als Sulfidquelle, während Eisencitrat das aufschlussreiche Mittel ist. Beide Verbindungen ermöglichen die Bildung eines schwarzen Niederschlags von Eisensulfid, der die Reaktion zeigt.

Der schwarze Niederschlag in der Mitte der Kolonie mit einem transparenten Halo verleiht Fischauge. Dieses Merkmal legt das Vorhandensein des Salmonellen -Genres nahe.

Schließlich behält Natriumchlorid das osmotische Gleichgewicht bei und der Agar bietet eine solide Konsistenz für die Umwelt.

Vorbereitung

Wiegen. Beobachten Sie die Mischung und lassen Sie sich dann 10 bis 15 Minuten in Ruhe. Es kann erhitzt und kocht werden, um bis zu seiner Gesamtauflösung Drehbewegungen zu verleihen. Dieses Medium ist in Autoklaven nicht sterilisiert.

Wenn das Medium eine ungefähre Temperatur von 45 ° C erreicht, wird ein Volumen von 20 ml in Petrisch -Sterilplatten direkt gegossen.

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Der Agar ist verfestigt. Zu dieser Zeit sind sie bereits bereit für den Gebrauch. Es ist ratsam, sie sofort zu verwenden. Wenn nicht möglich, werden sie bis zu ihrer Verwendung im Kühlschrank gehalten.

Die Platten müssen im Voraus vom Kühlschrank entfernt werden, bevor sie sie säen, um Umgebungstemperatur zu erhalten.

Der mittlere pH -Wert muss 7,5 ± 0,2 betragen. Die Farbe des dehydrierten Mediums ist lila und vorbereitete Farbe braun grün.

Verwenden

Die Verwendung von Heektoen -Agar wird für die Suche nach Bakterien der Gattung Shigella und Salmonellen in Lebensmittel- und Nahrungsmittelproben empfohlen.

Die Möglichkeit, diese Bakterien zu isolieren, wird erheblich erhöht, wenn die Probe in speziellen Brühen zuvor angereichert ist.

Das Inokulum muss stark sein und die Pflanzung erfolgt durch Stression. Die Platten werden 24 bis 48 Stunden bei Aerobiose bei 37 ° C inkubiert.

Inkubation für 48 Stunden wird empfohlen, da die Eigenschaften der Kolonien zu diesem Zeitpunkt für Interpretation und Differenzierung klarer sind.

QA

Um die Qualitätskontrolle für dieses Medium durchzuführen, werden zertifizierte Bakterienstämme verwendet, wie z. B.: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Shigella Flexneri ATCC 12022 und Shigella Sonnei ATCC 25931.

Die erwarteten Ergebnisse sind wie folgt: Salmonella Typhimurium und  Salmonella Enteritidis Sie müssen grüne - bläuliche Kolonien mit oder ohne schwarzes Zentrum entwickeln. Während Shigella -Arten als grün - bläuliche Kolonien wachsen werden.

Sie können auch Stämme von einschließen Escherichia coli ATCC 29212, Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Enterococcus faecalis ATCC 29212 und Staphylococcus aureus ATCC 25923.

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In diesen Fällen sind die beobachteten Merkmale Folgendes: UND. coli Und K. Lungenentzündung Sie werden in diesem mittleren Kolonien Lachs bis orange entwickeln, mit einem Niederschlag der gleichen Farbe herum. Während Proteus blaugrüne Kolonien mit oder ohne schwarzes Zentrum entwickelt.

Während S. aureus Und  UND. Faecalis Sie müssen manchmal gehemmt werden UND. Faecalis schafft es, als gelbe, sehr kleine Kolonien zu wachsen.

Andererseits ist es wichtig, die Sterilität des Mediums zu bewerten, da dieses Medium nicht sterilisiert wird. Aus jedem vorbereiteten Grundstück müssen sie daher von ein bis zwei Platten inkubiert werden, ohne 24 Stunden lang 37 ° C bei Aerobiose zu inokulieren.

Offensichtlich wird auf der Platte kein Wachstum erwartet.

Einschränkungen

-Proteus -Arten können sich in diesem Medium entwickeln und die Eigenschaften ihrer Kolonien können mit Salmonellen- oder Shigella -Arten verwechselt werden. Aus diesem Grund muss jede verdächtige Kolonie mit biochemischen Tests bestätigt werden.

-Es ist notwendig, die Verwendung dieses Mediums mit anderen weniger selektiven Altersalter zu begleiten, denn wenn der gesuchte Mikroorganismus in geringen Konzentrationen ist, konnte er sich in diesem Medium nicht entwickeln.

-Während seiner Vorbereitung nicht überhitzt, da übermäßige Hitze die Zusammensetzung der Umwelt verändert.

-Ungewöhnlich Kolonien von laktose fermentierenden Salmonellen können erscheinen, die unbemerkt bleiben können.

Verweise

1. Wikipedia -Mitwirkende. Heektoen Enterrric Agar. Wikipedia, die freie Enzyklopädie. 13. März 2019, 23:38 UTC. VERFÜGBAR UM: .Wikipedia.Org/ Zugriff am 16. März 2019.
2. BD Laboratories. BD HeKtoen Enterrric Gang (er gank). 2013. Verfügbar bei: BD.com
3. Britania Laboratories. Heektoen Entérico Agar. 2015. Erhältlich bei: Britanialab.com
4. Diffco Laboratories Francisco Soria Melguizo. HAKTOEN AGAR. Erhältlich bei: F-Soria.Ist
5. DIFCO & BBL -Handbuch, Heektoen Entzerric Agarar. 2. Auflage. Verfügbar in: BD.com/Europa