Salmonella-Shigella-Agar

Er Salmonella-Shigella-Agar Auch als SS -Agar bekannt, handelt es sich um ein mäßig selektives und differentiell.

Der SS -Agar hat eine komplexe Zusammensetzung; Es besteht aus Fleischextrakt, Pepton, Lactose, Gallensalzen, Natriumcitrat, Natriumthiosulfat, Eisencitrat, Agar, neutralem Rot, hellgrün und destilliertem Wasser. Angesichts seiner großen Selektivität können Proben mit reichlich gemischter Flora gesät werden.

SS -Agar mit Salmonella SP -Kolonien. Quelle: Manurx27 [CC BY-SA 4.0 (https: // creativecommons.Org/lizenzen/by-sa/4.0)] aus Wikimedia Commons

In mikrobiologischen Labors wird das Salmonella-Shigella-Medium häufig verwendet, um das Vorhandensein von Salmonellen und Shigella in Proben von Durchfallkot, Abwasser, Trinkwasser und Nahrung zu untersuchen.

Manchmal ist es notwendig, Pre-Enrique-Brühen (Lactosado-Brühe) und Anreicherung (Selenito Cistina-Brühe) zu verwenden, um Salmonellenstämme zu erholen.

Diese Schritte sind erforderlich, wenn das Vorhandensein von Salmonellen in sehr geringer Menge vermutet wird oder wenn der Stamm durch industrielle Produktionsprozesse, hauptsächlich verarbeitete Lebensmittel, misshandelt werden kann. Es ist auch ratsam, Stuhlproben von Patienten zu bereichern, die mit Antibiotika behandelt wurden.

Anschließend kann die angereicherte Brühe in Salmonella-Shigella-Agar und in anderen ähnlichen Medien wie Xilosa Agar, Lysina Desoxicolat (XLD) und Agar Heektoen enteric (er) gesät werden.

Basis

Jede Komponente der Salmonella-Shigella-Kultur hat eine bestimmte Funktion, und die Mischung als Ganzes liefert die Eigenschaften, die sie charakterisieren.

Ernährungskraft

Fleischextrakt und Pepton (verdaut mit tierischem Gewebe) liefern die erforderlichen Nährstoffe (Nitrogene, Kohlenstoff und Vitamine) für die Entwicklung von Mikroorganismen, die den Rest der Komponenten tolerieren können.

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Konsistenz

Der Agar -Agar ist dafür verantwortlich, der Umwelt eine solide Konsistenz zu erzielen.

Selektiv

Dieses Medium ist sehr selektiv, weil es Gallensalze, Natriumcitrat und hellgrünes enthält. Daher hemmt es das Wachstum aller gram positiven Bakterien und die meisten gramnegativen Bazillen, einschließlich einiger Coliformen.

Während die Bakterien der Gattung Salmonella und einige Shigellastämme, wenn sie diese Verbindungen unterstützen.

Hauptsächlich ist die Gattung Salmonellen sehr resistent gegen Gallensalze, so sehr, dass sie in der Gallenblase einiger Trägerpatienten leben können, die ständig Bakterien mit Kot ausstrahlen.

Differential

Laktose ist fermentierbar. Diese Eigenschaft wird durch das Vorhandensein des pH -Indikators belegt, der in diesem Medium das Rot von Fenol ist.

Laktose -fermentierende Stämme geben rote Kolonien, während nicht farblos farblos ist. Diese Funktion ist wichtig, da Salmonellen und Shigella Laktose nicht fermentieren.

Andererseits enthält dieses Medium Natriumthiosulfat als Quelle für Sulfid und Eisen Citrat als Eisenquelle. Beide Verbindungen schaffen es, Bakterien zu differenzieren, die in der Lage sind, Wasserstoffsulfid zu produzieren. Diese reagieren, um einen schwarzen Niederschlag von unlöslichem und sichtbarem Eisensulfid zu bilden.

Diese Eigenschaft hat einige Stämme der Salmonellengattung. Normalerweise sind seine Kolonien farblos flach mit einem schwarzen Punkt in der Mitte desselben. Der Rest der Salmonellas produziert nicht H₂S und entwickeln sich als farblose Kolonien.

Andererseits sind die Kolonien der Shigella Gattung farblos flach, ohne schwärben.

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Vorbereitung

Dieses Medium ist sehr einfach vorzubereiten.

Wiegen Sie 63 g dehydriertes Handelsmedium und lösen Sie in einem Liter destilliertem Wasser auf. Die Lösung erhitzen und schütteln.  Die Mischung kann das Kochen für Minuten für Minuten erreichen.

Dieses Medium sollte nicht autoklaviert werden. Nach seiner Auflösung wird es direkt auf einfachen oder doppelten sterilen Platten verwendet.

Durch Verfestigung werden sie in umgekehrter Weise in Blutplättchen bestellt und in Kühlschrank (2-8 ° C) bis zur Verwendung gelagert.

Das Medium nach der Vorbereitung muss bei pH 7,2 ± 0 liegen.2 und mit orange rot.

Es ist wichtig, die Platten vor dem Aussaat der Proben temperieren zu lassen. Das ursprüngliche Beispiel kann direkt gesät werden, das Material in einem Teil des Agars herunterlädt und dann von dort durch Erschöpfung zu kämpfen hat.

Im Falle eines Tragens angereicherter Brühen, der Übergabe eines Teils der Selenito -Brühe und der Säen mit Drigalski Spatel.

37 ° C werden 24 Stunden bei Aerobiose inkubiert.

Denken Sie daran, dass die Anzahl der Gramm trotz und der letzte pH -Wert des Mediums von einem Handelshaus zu einem anderen variieren kann. Das mittelgroße Böse bringt immer die Indikationen für seine Vorbereitung.

Verwenden

Es wird häufig bei der Analyse von Koproulturen und in der mikrobiologischen Untersuchung von Abwasserproben, Verbrauchsgewässern und Lebensmitteln verwendet.

Häufig werden Doppelplatten vorbereitet, auf der einen Seite wird der Salmonella-Shigella-Agar platziert und in der anderen XLD-Agar.

Einschränkungen

-Einige Shigella -Stämme wachsen in diesem Medium nicht. Daher wird es nicht für die primäre Isolierung dieses Genres empfohlen.

-Nicht jede transparente Kolonie mit schwarzem Zentrum zeigt Salmonellen; Biochemische Tests müssen durchgeführt werden, um eine korrekte Identifizierung zu erstellen, da die Kolonien einiger Proteinstämme nicht von denen von Salmonellen zu unterscheiden sind.

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-Das dehydrierte Medium muss sich um die Umwelt ausgesetzt sein, da es sehr hygroskopisch ist. Daher muss es in einer trockenen und gut geschlossenen Umgebung aufbewahrt werden. Für sehr kurze Zeiträume geöffnet.

-Im Laufe der Zeit können die Gallensalze des Mediums ausfallen und ein Bild bilden, das einem verschränkten Inneren des Agars ähnelt, aber dies wirkt sich nicht auf die Ergebnisse aus.

-Einige Shigella -Stämme können Laktose langsam fermentieren.

QA

Um zu beweisen, dass das Medium richtig funktioniert, ist es ratsam.

Dazu können Sie Stämme von verwenden UND. Coli, Enterobacter SP, Klebsiella pneumoniae, Shigella Flexneri, Salmonella Typhimurium entweder Enterococcus faecalis.

Die erwarteten Ergebnisse sind:

Escherichia coli --Rosa konvexe Kolonien.

Enterobacter und Klebsiella- Große Kolonien und rote oder rosa Schleimhäule.

Shigella Flexneri --flache oder farblose flache Kolonien.

Salmonella typhimurium - farblose Kolonien mit schwarzem Zentrum.

Enterococcus faecalis-- Totale Hemmung.

Verweise

1. Diffco Laboratories Francisco Soria Melguizo. Salmonella-Shigella-Agar. Erhältlich bei: F-Soria.Ist
2. BD Laboratory. BD Salmonella-Shigella Agar. Verfügbar bei: BD.com