Blutagar

Ein Blutansatz. Mit Lizenz

Was ist Blutagar?

Er Blutagar Es handelt.

Dieses Kulturmedium besteht im Grunde genommen aus einem angereicherten Basenagar und 5% Schafblut. Die Agar -Basis kann je nach Bedarf variieren, wird jedoch hauptsächlich aus Peptonas, Aminosäuren, Vitaminen, Fleischextrakt, Natriumchlorid und Agar bestehen. Was das Blut betrifft, wird menschliches Blut manchmal verwendet.

Die Blutsammlung kann im Labor erstellt werden oder bereits gekauft werden, von Unternehmen, die sich dem gewidmet haben. Die Vorbereitung dieses Mediums ist sehr empfindlich, jede Nachlässigkeit in seiner Ausarbeitung wird zu einem kontaminierten Grundstück führen.

Daher müssen alle möglichen Vorsichtsmaßnahmen getroffen werden und führen am Ende eine Qualitätskontrolle durch, die 37 ° C 1 Platte pro 100 inkubiert, die vorbereitet werden.

Basis

Staphylococcus aureus im Blutagar gezüchtet. Quelle: Nathan Reading über Flickr Nathan R. Auf Twitter Wikimedia Commons

Blutagar ist ein angereichertes, differentielles und nicht -selektives Medium. 

• Es ist ein angereichertes Medium, weil es als Hauptadditiv 5-10% Blut auf einer Agarbasis trägt. Beide Verbindungen enthalten viele Nährstoffe, die es den meisten kultivierbaren Bakterien ermöglichen, darin zu wachsen.
• Dieses Wachstum tritt ohne Einschränkung auf, daher ist es nicht selektiv. Wenn jedoch Verbindungen hinzugefügt werden, die das Wachstum einiger Mikroorganismen verhindern und die anderer bevorzugen, wird es selektiv. Zum Beispiel, wenn bestimmte Arten von Antibiotika oder Antimykotika hinzugefügt werden.
• Es ist differentiell, da es die Unterscheidung von 3 Arten von Bakterien ermöglicht: Beta-Hemolytik, Alpha-Hämolithikum und Gamma-Hemolytikum.
• Beta-Hemolytik. Beispiele für ß-hemolytische Bakterien sind Streptococcus pyogenes Und Streptococcus agalactiae.
• Alpha-hemolytisch sind diejenigen, die eine teilweise Hämolyse durchführen, wo Hämoglobin zu Methämoglobin oxidiert wird, wodurch eine grünliche Färbung um die Kolonien erzeugt wird. Dieses Phänomen ist als α- oder α-Hämolyse-Hämolyse bekannt, und Bakterien werden als α-hämolytisch eingestuft. Beispiel für α-hämolytische Bakterien sind Streptococcus pneumoniae Und Streptococcus aus der Gruppe Viridans.
• Gamma-hämolytische oder nicht-hemolytische Bakterien wachsen über Agar, ohne Veränderungen in IT zu erzeugen, ein Effekt, der als γ-Hämolyse bekannt ist, und der Mikroorganismus sind γ-Hämolithikum. Beispiel für γ-hämolytische Bakterien: einige Stämme von Streptococcus von Gruppe D (Streptococcus bovis und Enterococcus faecalis).

Anwendungen

• Dieses Kulturmedium ist eines der am häufigsten verwendeten im mikrobiologischen Labor. Zu den Mikroorganismen, die in diesem Medium wachsen können, gehören: strenge, optionale, mikroaerophile, anaerobe, gram -positive oder gramnegative Bakterien, schnelle Wachstumsbakterien oder langsames Wachstum oder langsames Wachstum.
• Einige anspruchsvolle oder nervige Bakterien wachsen ebenfalls aus Nährstoffstand sowie Pilze und Hefen. Es ist nützlich für subjektive oder reaktivierende Stämme, die metabolisch sehr schwach sind.

Kann Ihnen dienen: Cyclopentanoperhydropenantreno: Struktur und Wichtigkeit

Die Wahl der Blut- und Basisbehörde hängt jedoch je nach Mikroorganismus und der Verwendung der Platte ab (Kultivierung oder Antibiogramm).

Auswahl der Blutgruppe

Blut kann aus Lamm, Kaninchen, Pferd oder Mensch sein.

Am meisten empfohlen ist Lammblut, mit Ausnahme einiger Ausnahmen. Zum Beispiel zu isolieren Arten von Haemophilus, Wo empfohlenes Blut Pferd oder Kaninchen ist, da Lammblut Enzyme hat, die den Faktor V hemmen V.

Das am wenigsten empfohlene ist der Mensch, obwohl es am häufigsten verwendet wird, vielleicht weil es am einfachsten zu erhalten ist. 

Blut muss defininiert, ohne Additiv und von gesunden Tieren erhalten werden. Für die Verwendung von menschlichem Blut müssen mehrere Faktoren im Auge behalten werden:

• Wenn Blut von Personen stammt, die bakterielle Infektionen erlitten haben, besitzen sie bestimmte Antikörper. Unter diesen Bedingungen ist es wahrscheinlich, dass das Wachstum einiger Bakterien gehemmt wird.
• Wenn es aus der Blutbank erhalten wird, enthält es Citrat und es ist möglich, dass sich bestimmte Bakterien nicht in Gegenwart entwickeln.
• Wenn Blut von Patienten stammt, die Antibiotika einnehmen, kann das Wachstum von anfälligen Bakterien gehemmt werden.
• Und wenn Blut von einer Diabetiker stammt, stört überschüssige Glukose die richtig entwickelnden Hämolysemuster.

Auswahl der Grundrate

Grundagar, das für die Vorbereitung des Blutagars verwendet wird, kann sehr breit sein. Unter ihnen sind: Nähragar, Cerebro -Herzinfusion, Triptychonsojbeans, Müeller Hinton, Thayer Martin, Columbia Agar, Brucella Agar, Campylobacter Agar usw.

Verwendung von Blutagar nach dem für die Herstellung verwendeten Basismedium

Nährstoff-Agar

Diese Basis ist die am wenigsten verwendete, da sie hauptsächlich nicht absorbierende Bakterien wie enterische Bazillen wachsen lassen, Pseudomonas sp, S. Aureus, Bacillus sp, unter anderen. Es wird nicht empfohlen, zu isolieren Streptococcus.

Cerebro -Herzinfusion (BHI)

Es ist eine der am häufigsten als Basis verwendeten, da es über die notwendigen Nährstoffe für das Wachstum der meisten Bakterien verfügt, einschließlich Streptococcus sp und andere anspruchsvolle Bakterien. Obwohl es nicht angemessen ist, Hämolysemuster zu beobachten.

Mit dieser Basis wird Blut des Lammes verwendet.

Sie können auch Blutagarvarianten vorbereiten, bei denen andere Verbindungen zugesetzt werden, um bestimmte Mikroorganismen zu isolieren. Zum Beispiel dient das mit Kaninchenblut, Cystin und Glukose ergänzt Francisella tularensis.

Während mit Cistina Telurito es nützlich ist zu isolieren CoryNebacterium diphteriae. Menschen oder Lammblut kann verwendet werden.

Kann Ihnen dienen: biotisches Potenzial

Mit der ersten wird die Beta-Trimolyse als schmaler Halo angesehen, während der Halo mit dem zweiten viel breiter sein wird.

Diese Basis wird zusammen mit Bacitracin, Maisstärke, Pferdeblut und anderen Anreicherungsergänzungsmitteln (ISVovalex) zur Isolierung der Geschlecht Haemophilus sp Aus Atemproben.

Wenn die Kombination von Chloramphenicol-Gentamycin oder Penicillin-Stuffyin-Antibiotika mit Pferdeblut hinzugefügt wird, dient es dazu, anspruchsvolle pathogene Pilze zu isolieren, selbst mit einer höheren Leistung für den Sabouraud-Glucose-Agar. Besonders ist isoliert nützlich Histoplasma capsulatum.

Triptyse Soja -Agar

Diese Basis ist am meisten empfohlen, um das Hämolysemuster und die Realisierung von diagnostischen Tests wie Opto -Corner- und Bacitracinsteuern besser zu beobachten. Es ist der klassische Blutagar, der von Routine verwendet wird.

Mit dieser Basis können Sie auch den speziellen Blutagar vorbereiten CoryNebacterium diphteriae, Mit Telurito Cistina Und Lammblut.

Die Kombination dieses Agarblutes, mehr Kanamycin-Vancomycin, ist besonders für anaerobe Wachstum ideal Bacteroides sp.

Müeller Hinton Agar

Diese durch Blut ergänzte Base wird verwendet, um das Antibiogramm von anspruchsvollen Mikroorganismen durchzuführen, wie z Streptococcus sp. Es ist auch nützlich, um Bakterien zu isolieren, wie z Legionel Pneumophila.

Thayer Martin Agar

Dieses Medium ist ideal als Blutagarbasis, wenn die Gattung des Verdachts der Gattung Neisseria, besonders Meningokokken, Angesichts dessen N. Gonorrhoeae Es wächst nicht im Blutagar. Es dient auch dazu, Anfälligkeitstests durchzuführen Meningokokken.

Columbia Agar

Diese Basis eignet sich hervorragend zum Aussaat von Proben von Magenbiopsien auf der Suche nach Helicobacter pylori.

Das Medium präsentiert 7% des defibrinierten Lammbluts mit Antibiotika (Vancomycin, Trimetoprim, Amphotericin B und Cefsulodin), um das Wachstum anderer Arten von Bakterien einzuschränken, die möglicherweise vorhanden sein können.

Dieselbe Base, die durch menschliches oder lammes Blut ergänzt ist, ist Nalidíxico und Colistinsäure nützlich zu isolieren Gardnerella vaginalis. Es ist auch ideal, die antimikrobielle Anfälligkeit für Antibiotika desselben Mikroorganismus zu bewerten.

Darüber hinaus dient es für die Herstellung von Blutagar für anaeroben Anbau und fügt Aminoglycoside und Vancomycin hinzu. Diese Basis ermöglicht es uns, Hämolysemuster richtig zu beobachten.

Brucella Agar

Dieses als Blood Agency Base verwendete Medium ist zusammen mit der Zugabe von Vitamin K ideal für die Kultivierung anaerobe Bakterien. In diesem Fall wird die Verwendung von Lammblut empfohlen.

Kann Ihnen dienen: Hautatmung: Eigenschaften und Beispiele von Tieren

Campylobacter Agar

Campylobacter -Agar, ergänzt mit 5% RAM -Blut und 5 Antibiotika (Cephalotin, Amphotericin B, Trimetoprim Campylobacter Jejuni In Kotproben.

Vorbereitung

Jedes Handelshaus bringt die Verpackung die Indikationen zur Vorbereitung eines Liter Kulturmedium. Die entsprechenden Berechnungen können durchgeführt werden.

Wiegen und auflösen

Der Basenagar ist dehydratisiert (in Staub), daher muss er in destilliertem Wasser gelöst werden, das auf pH 7,3 eingestellt wurde.

Die vom gewählte Grundagar angegebene Menge wird gewogen und in der entsprechenden Wassermenge in einem Fixola gelöst, dann über mäßige Wärme erhitzt und mit Drehbewegungen bis zum gesamten Staub vermischt.

Sterilisieren

Einmal gelöst, sterilisieren Sie in Autoklaven bei 121 ° C 20 Minuten.

Blutaggregat

Beim Verlassen des Autoklaven wird das Fixola abgekühlt, bis die Temperatur zwischen 40 und 50 ° C liegt. Es ist eine Temperatur, die menschliche Haut unterstützt, und gleichzeitig hat sich der Agar noch nicht erstarrt.

Dazu ist die Fixola von der Hand berührt und wenn die Wärme tolerierbar ist, ist es die ideale Temperatur, um das entsprechende defibrinierte Blut hinzuzufügen (50 ml pro Liter Agar). Mischen, um zu homogenisieren.

Der Durchgang des Blutaggregats ist entscheid.

Wenn es zu kalt hinzugefügt wird, werden Klumpen gebildet und die Oberfläche des Mediums ist nicht glatt, um das Striatum ordnungsgemäß zu machen.

Gießen Sie in Petri's Teller

In sterilen Petri -Platten unmittelbar nach dem Homogenisieren von Blut servieren. In jeder Petrischplatte wird ungefähr 20 ml gegossen. Dieses Verfahren wird in einer laminaren Flussglocke oder in der Nähe des Feuerzeugs durchgeführt.

Zum Zeitpunkt des Blutes von Blut auf Petri -Platten sollten Luftblasen nicht auf der Plaque -Oberfläche gelassen werden. In diesem Fall wird die Flamme von Bunsens Feuerzeug schnell auf dem Teller weitergegeben, um sie zu entfernen.

Die Platten dürfen sich verfestigen und werden bis zur Verwendung in Kühlschrank (2-8 ° C) gespeichert. Bevor sie Blutagarplatten verwenden, müssen sie temperieren, um säen zu können.

Die vorbereiteten Platten haben eine ungefähre Dauer von 1 Woche.

Verweise

1. Bayona, m. Mikrobiologische Zustände für den Anbau von Helicobacter pylori. Rev. Kohl. Gastroenterol. 
2. Forbes, B ,, Sahm, D., Weissfeld, a. Mikrobiologische Diagnose von Bailey & Scott. Pan -American Editorial s.ZU.