Hellgrüner Agar, Grundlage, Vorbereitung, verwendet

Er Hellgrüner Agar Es ist ein solides Kulturmedium mit einem hohen Maß an Selektivität. Es wird ausschließlich für die Isolierung von Stämmen der Gattung Salmonella verwendet; Es gibt jedoch einige Ausnahmen, wie die Typhi- und Parathyphi -Arten, die in diesem Medium nicht wachsen.

Die Suche nach dem Salmonellengenre ist häufig in Stuhl-, Wasser- oder Nahrungsmittelproben. In diesem Sinne kann dieses Medium sehr nützlich sein. Dieser Agar wurde 1925 von Kristensen, Lester und Jurgens gegründet, später von Kauffmann verändert wurde.

Es besteht aus Multiplayonen aus verdauten tierischen Gewebepeptikern und digratem Kasein, enthält auch Hefeextrakt, Natriumchlorid, Laktose, Saccharose, Phenolrot, hellgrün und grip.

Es zeichnet sich durch ein ziemlich unwirtliches Medium für die meisten Bakterien aus, bevorzugt das Wachstum von Salmonellen, aber einige Coliformen können sich darin bestehen, sich schwach entwickeln.

Es ist wichtig zu hervorheben, dass das Shigella -Genre in diesem Medium nicht wächst und auch nicht Salmonella typhimurium, weder Salmonella paratyphi. Wenn Sie diese Mikroorganismen isolieren möchten, sollten unter anderem andere Medien wie der XLD -Agar verwendet werden.

Basis

Hellgrüner Agar

Jeder der Komponenten, aus denen das Medium besteht.

Pluripeptons und Hefeextrakt sind die Quelle von Nährstoffen, bei denen Mikroorganismen Stickstoff und Mineralien aufnehmen, die für ihre Entwicklung erforderlich sind. Laktose und Saccharose sind Energiequellen für Mikroorganismen, die sie fermentieren können.

Hellgrün ist die Inhibitorsubstanz, die die Entwicklung von gram positiven Bakterien und eine große Anzahl von Gramm negativen Mikroorganismen verhindert.

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Natriumchlorid bietet der Umwelt osmotische Stabilität. Während das rote Phenol der pH -Indikator ist, ist dieselbe Farbe Vira beim Nachweis der Produktion von Säuren aus Kohlenhydratfermentation.

Nicht -fermentäre Kolonien von Laktose und Saccharose wachsen in diesem Medium einer weißen oder transparenten weißen Farbe auf einem roten Hintergrund. Zum Beispiel Bakterien der Salmonellengattung.

Während Laktose- oder Saccharose -fermentierende Bakterien in diesem Medium in der Lage sind, auf einem grünlich gelben Hintergrund gelb oder gelbgelb zu wachsen. Zum Beispiel, Escherichia coli und Klebsiella pneumoniae.

Hellgrüne Agarvarianten (BGA)

Es gibt andere Varianten des hellgrünen Agars; Hellgrün grün Girvobiocin Apar (NBG) und Brilliant Gier wurden Glicerol Avocin Lactose (NBGL).

Der hellgrüne Novobiocin -Agar -Glukose (NBG)

Es enthält Soja -Sojabohnenlandwirtschaft, Eisen ammonium citro.

Es wird verwendet, um Salmonellenkolonien aus Stuhlproben zu isolieren.

In diesem Fall sind das hellgrüne und das Novobiocin die inhibitorischen Substanzen, die das Wachstum von Gram -positiven Bakterien und einige gram negative Mikroorganismen verhindern.

Natriumthiosulfat ist die Schwefelquelle und Eisen Citrat ist die Eisenquelle, die beide notwendig ist, um die Produktion von Schwefelwasserstoff durch die Bildung eines schwarzen Niederschlags von Eisensulfid aufzudecken.

Glukose ist fermentierbares Kohlenhydrat und Phenolrot ist der pH -Indikator.

In diesem Medium entwickelt. Einige Stämme von Citrobacter fruundii produzieren identische Kolonien zu der von Salmonellen.

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Brilliantes Glicerolgrün grünes Avobiocin -Laktoseglycerin (NBGL)

Dieses Medium enthält Soja -Sojabohnenlandwirtschaft, Eisen -Ammoniumcitrat, Natriumthiosulfat, Lactose, Glycerin, hellgrün, Novobiocin und destilliertes Wasser.

Der Unterschied in diesem Medium mit dem vorherigen.

Das Medium wird auch verwendet, um Salmonellenspezies, die Kolonien, durch die Produktion von Schwefelwasserstoff zu isolieren.

Nur Kolonien, die keine Säure aus Glycerin oder Laktose produzieren₂S ausreichend, weil der pH unter die Bildung von H untermischt₂S. Dies führt zu farblosen Kolonien für die meisten Proteus- und Cytrobacter -Arten.

Vorbereitung

-Wiegen Sie 58 Gramm des dehydrierten Mediums im Handel. Fügen Sie es in einen Liter ausgebauten Wasser hinzu. Mischen, einige Minuten stehen lassen und eine Vorbereitung an eine Wärmequelle senden, bis sie sich vollständig auflöst.

-Autoklav bei 121 ° C für 15 Minuten, überschreiten die Sterilisationszeit nicht.

-Auf Petrisch -Sterilteller stehen und noch heiß servieren. Der endgültige pH muss 6,9 ± 0,2 betragen.

-Verfestigen und im Kühlschrank bis zur Verwendung sparen lassen. Vor dem Aussaat der Teller müssen sie Raumtemperatur nehmen.

-Das Pulver ist grün und zubereitet eine orangebraune oder rotgrünte Farbe, abhängig vom pH und dem Handelshaus. Eine sehr braune Farbe zeigt, dass der Agar überhitzt wurde.

-Sobald der Agar nicht empfohlen wird, wird nicht empfohlen, sich wieder zu bauen, da sich das Medium verschlechtert.

Verwendet/Anwendungen

Dieses Medium wird unter anderem für die Suche nach Stämmen der Gattung Salmonella -Proben von Kot und Milchprodukten verwendet.

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Als ziemlich unwirtliches Mittel ist es ratsam, ein reichhaltiges Inokulum zu säen, wenn die direkte Probe verwendet wird. Andernfalls sollten vor der Anreiz und Anreicherung von Proben vor der Aussaat in diesem Medium durchgeführt werden.

Da einige Salmonellenstämme in Schwierigkeiten gehemmt sind oder wachsen, ist es ratsam, dieses Medium mit anderen selektiven Altersalter für Salmonellen zu begleiten.

Jede Kolonie mit einem typischen Salmonellencharakteristik muss biochemischen Tests zur endgültigen Identifizierung unterzogen werden.

QA

Um die ordnungsgemäße Funktion des hellgrünen Agars zu testen. ATCC -Stämme können verwendet werden, um ihre Entwicklung darauf zu beobachten.

Die häufigsten Stämme, die für die Qualitätskontrolle verwendet werden, sind: Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella Flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.

Die ersten 3 müssen rosa oder transparente weiße Kolonien auf einem roten Hintergrund geben. Salmonellen mit guter Entwicklung und Proteus mit knappem oder regelmäßigem Wachstum.

Für Klebsiella und Escherichia werden grünlich gelbe Kolonien mit gelbem Hintergrund erwartet, und im Fall von Shigella und Staphylococcus müssen sie inhibiert werden.

Das dehydrierte Medium muss bei Raumtemperatur an einem trockenen Ort gelagert werden, da das Medium sehr hygroskopisch ist.

Verweise

1. Britania Laboratory. Hellgrüner Agar. 
2. BD Laboratory. BD Brilliant Green Agar.