Vogel-Johnson Agar Was ist, Foundation, Vorbereitung, verwendet

Er Vogel-Johnson Agar Es handelt Staphylococcus aureus. Dieses Medium wurde 1960 von Vogel und Johnson aus der Modifikation des 1955 von Zebovitz, Evans und Niven formulierten Telurito Glycina -Agar geschaffen.

Die Modifikation bestand darin, die in der Umwelt vorhandene Manitkonzentration und den Einbau eines pH -Werts zu erhöhen. Die Stromformel besteht aus Tripteína, Hefeextrakt, Mannitol, Dipotium -Phosphat, Lithiumchlorid, Glycin, Phenolrot, Agar, 1% Kalium -Teluritlösung.

Es ist zu beachten, dass es andere Medien gibt, die wie der Vogel-Johnson-Agar für die Isolierung von selektiv sind S. aureus, wie salzige Mannitol -Agar und Baird Parker Agar. In diesem Sinne könnte gesagt werden, dass das Fundament des Vogels - Johnson zustimmt.

Im ersten die Kolonien von S. aureus Sie unterscheiden sich durch Fermentol. Andererseits in der Sekunde die S. aureus Es ist gekennzeichnet, indem Teluro auf Teluro reduziert und graue Kolonien auf schwarz gebildet werden. Beide Eigenschaften werden im Vogel-Johnson-Agar beobachtet.

Dieses Medium ist wie seine Gegenstücke nützlich für die Erkennung von Staphylococcus aureus In Lebensmittelproben, Gesundheitskontrollen von Industrieprodukten und in klinischen Proben.

Basis

Nährstoffbeitrag

Das Vogel - Johnson Medium enthält Triptein- und Hefeextrakt; Beide Substanzen liefern langkettige Aminosäuren, die als Kohlenstoff- und Stickstoffquellen dienen, die für das Bakterienwachstum erforderlich sind. Die Bakterien, die in diesem Medium wachsen können, nimmt die Nährstoffe dieser Substanzen an.

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Selektive Kraft

The Vogel - Johnson Agar ist in der Lage, das Wachstum von Gram -negativen Bakterien und sogar einige positive Gramme zu hemmen, was die Entwicklung positiver Koagulase -Staphylokokken begünstigt. Inhibitorsubstanzen sind Kalium -Tellurit, Lithiumchlorid und Glycin.

Differentialkraft

Die Substanzen, die dieses unterschiedliche Medium machen. Manit ist ein Kohlenhydrat, und wenn fermentierte Säuren erzeugt werden, die das Medium von Rot bis Gelb machen, was dank des Vorhandenseins des Indikators des roten pH -Werts auftritt.

Während der farblose Telurit, wenn es auf metallisch freies Teluro reduziert wird, ist eine dunkelgraue Farbe.

Er Staphylococcus aureus Fermentiert das Mannit und reduziert das Teluro nach Teluro. Deshalb die typischen Kolonien von S. aureus In diesem Medium sind sie grau oder schwarz von einem gelben Medium umgeben.

Bakterien, die in diesem Medium wachsen und Telurit nicht reduzieren oder das Mannitol fermentieren, bilden transparente Kolonien, die von einem roten Medium umgeben sind, das aufgrund der Alkalinisierung des Medium.

Andererseits wächst die Bakterien, die das Telurit, aber nicht fermentieren, das Manit, wenn graue oder schwarze Kolonien von einem intensiven roten Medium umgeben sind.

Wenn das Medium ohne Hinzufügung des Kalium -Tellurits hergestellt wird, die Kolonien von S. aureus Sie würden sich als gelbe Kolonien entwickeln, umgeben von einem gelben Medium, wie es im salzigen Mannit -Agar geschieht.

Osmotisches Gleichgewicht und Verhaltensmittel

Dipotium -Phosphat hält das osmotische Gleichgewicht des Mediums und passt den pH -Wert an die Neutralität 7.2 ein. Während der Agar dem Kulturmedium eine solide Konsistenz verleiht.

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Vorbereitung

1% P/V Kalium -Teluritlösung

Diese Lösung ist nicht in der dehydrierten Umgebung enthalten, da sie nicht in Autoklaven sterilisiert werden kann. Aus diesem Grund wird es voneinander zubereitet und dem bereits sterilisierten Medium hinzugefügt.

Einige Handelshäuser verkaufen die 1% ige Kalium -Telurit -Lösung bereit, bereit zu verwenden. Wenn Sie sich im Labor vorbereiten möchten, gehen Sie wie folgt vor:

Wiegen 1.0 g Kaliumtellurit und 100 ml destilliertes Wasser messen. Lösen Sie das Kalium -Telurit in einem Teil des Wassers und vervollständigen Sie dann die Wassermenge, bis es 100 ml erreicht. Sterilisieren Sie die Lösung nach der Filtrationsmethode.

Vogel-Johnson-Agar-Basis

Wiegen Sie 60 g des dehydrierten Mediums und löst sich in 1 Liter destilliertem Wasser auf. Die Mischung wird auf das Kochen erhitzt, um die vollständige Lösung zu unterstützen. Während des Auflösungsprozesses wird das Medium häufig aufgeregt.

Sterilisieren Sie in Autoklaven 15 Pfund Druck und 121 ° C 15 Minuten. Aus dem Autoklav nehmen und stehen lassen, bis das Medium eine ungefähre Temperatur von 45 bis 50 ° C erreicht. Fügen Sie 20 ml der Kalium -Teluritlösung hinzu, die zuvor bei 1% hergestellt wurde.

Petrisch -Sterilplatten mischen und gießen. Ersticken und bestellen Sie in einer umgekehrten Platte.

Der endgültige pH des vorbereiteten Mediums muss bei 7,2 ± 0,2 liegen.

Bevor Sie eine Probe säen, müssen Sie warten, bis die Platte die Temperatur der Umgebung übernimmt.

Die Farbe des vorbereiteten Mediums ist rot.

Verwenden

Obwohl es zur Isolierung von verwendet werden kann S. aureus In jeder Art von Proben wird es hauptsächlich für die mikrobiologische Analyse von Arzneimittelprodukten, Kosmetika und Lebensmitteln verwendet.

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Es wird empfohlen, das Inokulum dicht zu sein. Die Aussaat kann durch Stragen mit Platingriff oder durch Oberfläche mit Drigalski Spatel erfolgen.

Die Platten werden bei 35-37 ° C für 24 bis 48 Stunden bei Aerobiose inkubiert.

QA

Um die Qualitätskontrolle für die Vogel-Johnson-Umgebung durchzuführen, können Sie die folgenden Stämmensteuerungen verwenden:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Das erwartete Ergebnis ist wie folgt: für die Stämme von S. aureus zufriedenstellendes Wachstum mit schwarzen Kolonien, die von gelbes Medium umgeben sind. Für S. Epidermidis Regelmäßiges Wachstum mit durchscheinenden oder schwarzen Kolonien, die von rotem Medium umgeben sind.

Auch zu UND. coli Es wird erwartet, dass es eine totale Hemmung geben wird, und für Proteus mirabilis partielle oder totale Hemmung; Wenn es wächst, wird es es kaum tun und die Kolonien werden schwarz von rotem halben Farben umgeben sein.

Verweise

1. BD Laboratories. VJ (Vogel und Johnson Agar). Verfügbar bei: BD.com
2. Britania Laboratories. Vogel-Johnson Agar. Erhältlich bei: Britanialab.com