Agar XLD Foundation, Vorbereitung und Verwendung

Er Xld Agar o Acho Xilosa Lysin -Desoxicat ist eine selektive und differentielle feste Kultur für die Enteropathogene Isolierung. Taylor entwarf die XL -Agar -Formel (Xylose, Lysin), um die Isolierung der Shigella -Gattung zu verbessern.

Er merkte an, dass dieses Genre in den meisten Medien gehemmt wurde, die für die Enteropathogen -Isolierung bestimmt waren. Anschließend wurde er Natriumdexikolat, Natriumthiosulfat und Eisen amonisches Citrat zugesetzt, um seine Selektivität zu erhöhen. Diese Formel hat sich sowohl für Shigella als auch für die Salmonellenisolation als nützlich erwiesen.

Unterschiede zu den Kolonien von Shigella, Salmonellen und Coliformen in Agar XLD. ZU. Shigella sp, b. Salmonella sp, c. Coliforme. Quellen: a. Von: CDC/ Amanda Moore, MT; Todd Parker, PhD; Audra Marsh, Mit freundlicher Genehmigung: öffentliche Gesundheitsbildbibliothek b. https: // hochladen.Wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/salmonella_species_growing_on_xld_agar _--Zeigen_H2S_Produktion _-_ Detail.JPG c. Von: CDC/Dr. J. J. Landwirt, mit freundlicher Genehmigung: öffentliche Gesundheitsbibliothek

Der XLD -Agar besteht aus Hefeextrakt, Natrium, Xylose, Lysin, Lactose, Saccharose, Natriumthiosulfat, Eisen Ammoniumcitrat, Natriumchlorid, Rotphenol und Agar und Agar. In den meisten Bakteriologie -Laboratorien wird das Agar XLD- und SS -Agar -Duo für die Untersuchung von Kotproben auf der Suche nach Shigella und Salmonellen verwendet.

Andere Labors bevorzugen die Kombination von Chromagar -Salmonellen und Agar XLD, unter anderem verfügbare Optionen. Diese Duos können in doppelten Petrie -Platten zubereitet werden. Auf einer Seite legen sie Agar XLD und auf der anderen Seite das andere ausgewählte Medium.

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Basis

-Ernährungskraft

Der XLD -Agar hat den Hefeextrakt, der als Nährstoffquelle für die Mikroorganismen dient, die sich in diesem Agar entwickeln. Darüber hinaus liefert das Vorhandensein von Kohlenhydraten (Xylose, Saccharose und Laktose) Energie für die Bakterien, die sie fermentieren können.

-Mittlere Selektivität

Als Hemmsubstanz zeigt es Natriumanordnung; Dies verhindert das Wachstum von gram positiv.

-Differentialkraft

Typische Shigella -Kolonien

Wie bereits erwähnt, enthält der XLD -Agar Xylose; Dieses Kohlenhydrat wird von allen Bakterien fermentiert, die in diesem Medium mit Ausnahme der Gattung Shigella wachsen.

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Dies ist eine der Eigenschaften, die sein unterschiedlicher Charakter anbietet, da Shigellas Kolonien den Rest unterscheiden, indem sie rote Kolonien entwickeln, während die anderen Bakterien gelbe Kolonien produzieren.

Typische Salmonellenkolonien

Die geschlechtsspezifische Salmonellen fermentiert auch die Xylose und erzeugt zunächst gelbe Kolonien. Nach der Erschöpfung des Xylose -Kohlenhydrats greift er Lysin durch sein Enzym -Lysin -Decarboxylase an. Die Lysin -Decarboxylierung erzeugt Alkalien, die die Farbe der Kolonie und das Originalrot zum Originalrot machen.

Dieses Verhalten wird nur von Salmonellen durchgeführt, da die Coliformen, die Decarboxyle. Dies liegt daran, dass Coliformen auch Laktose und Saccharose fermentieren; Daher ist die Säureproduktion sehr hoch und lässt die gelbe Kolonie in diesen Bakterien zurück.

Es ist zu beachten, dass die geschlechtsspezifische Salmonellen weder die Saccharose noch Laktose fermentieren.

H₂S

Der XLD -Agar ermöglicht es auch, die Arten von Salmonellenproduzenten von H nachzuweisen₂S; Zu diesem Zweck hat es die Sulfidquelle, die durch Natriumthiosulfat und einen Reaktionsentwickler dargestellt wird, der das Eisen -Ammoniumcitrat ist.

Letztere reagiert mit H₂S (farbloses Gas) und bildet ein sichtbares schwarzes Niederschlag unlöslicher Eisensulfat. In diesem Sinne werden die Eigenschaften von Salmonellas Kolonien mit einem schwarzen Zentrum rot sein.

Es sollte beachtet werden, dass für die Reaktion von H₂S, ein alkalischer pH -Wert wird benötigt. Deshalb andere Enterobakterien, die h bilden₂Sie können es nicht in dieser Umgebung tun oder schlecht tun, da die hohe Säuregehalt.

-Natriumchlorid, Agar und Phenolrot

Schließlich behält Natriumchlorid das osmotische Gleichgewicht bei. Der Agar ist das erstickende Mittel und das Rot des Phenols erkennt die pH -Veränderungen und drehen die Farbe der Kolonien und das Medium.

Vorbereitung

55 g xld dehydriert wiegen und in 1 Liter Wasser auflösen. Erhitzen und schütteln Sie die Mischung, bis sie den Siedepunkt erreicht. Nicht überhitzt, da Wärme das Medium schädigt und einen Niederschlag erzeugt, der die Morphologie der typischen Kolonien verändert.

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Dieses Medium sollte nicht autoklaviert werden. Beim Auflösen müssen Sie von 50 ° C in ein Badezimmer übergehen. Beim Abkühlen sollte direkt auf Petrisch -Sterilplatten serviert werden. Sie können in einfache Platten oder Doppelplatten zerstört werden. Sie dürfen bis zur Verwendung im Kühlschrank festigen und aufbewahren.

Temperament vor dem Gebrauch. Wie ein nicht sterilisiertes Medium wird empfohlen, es in der Nähe des Nutzungsdatums vorzubereiten.

Der endgültige pH -Wert des Mediums muss bei 7,4 ± 0,2 liegen. Die Farbe der vorbereiteten ist orange rot, durchscheinend, ohne Niederschlag.

Wenn es einen Lysin -Xylose -Agar (XL) gibt, können Natrium, Natriumthiosulfat und Amonic Iron Citrat zugesetzt werden. Auf diese Weise wird die XLD -Agarformel erhalten.

Anwendungen

Der XLD -Agar wird zur Wiederherstellung von Enteropathogenen verwendet, hauptsächlich der Shigella -Gattung und zweitens der geschlechtsspezifischen Salmonellen. Es ist nützlich, um Stuhl-, Wasser- und Lebensmittelproben zu bewerten.

Arten von Proben

Schemel

Die Stuhlproben können direkt im XLD -Agar gesät werden, was eine gute Verteilung des Materials darstellt, um isolierte Kolonien zu erhalten.

Um die Wiederherstellung von Salmonellen zu verbessern, stimmte die XLD aus Anreicherungsmitteln für Salmonellen zu.

Essen

Bei Lebensmitteln können Anreicherungsbraten für Salmonellen und Shigella verwendet werden. Für Salmonella können Sie unter anderem die Selenito -Broty Cystine, hellgrüne Tetrapationatbrühe verwenden.

Im Fall von Shigella kann es mit der Shigella-Brühe mit 0,5 µ/ml Novobiocina angereichert werden, die 16-20 Stunden bei 42 ° ± 1 ° C inkubiert werden.

Wasser

In der Wasseranalyse wird die Membranfiltrationstechnik und die Verwendung von XLD Agar unter anderem empfohlen.

Gesät und Identifikationsbedingungen

Das gesätte Medium wird in Aerobiose bei 35 ° C für 24 bis 48 Stunden inkubiert.

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Die typischen Kolonien jedes Genres werden beobachtet, die verdächtigen Kolonien sollten biochemische Tests zur Identifizierung durchgeführt werden.

QA

Zur Bewertung der mittelschweren Qualitätskontrolle können die folgenden bakteriellen Stämme verwendet werden: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella abträglich DSM 4224, Shigella Flexneri ATCC 12022, Shigella Sonnei ATCC 25931, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 33495.

Die Gattung Salmonella ist durch Präsentieren in diesen mittelroten Kolonien mit schwarzem Zentrum oder vollständig schwarzen Kolonien gekennzeichnet. Während in der Shigella Gattung die Kolonien rot sein müssen, heißt das die Farbe des Mediums.

Im Fall von Escherichia coli Es wird erwartet, dass es vollständig oder teilweise gehemmt ist; Wenn die Kolonien wachsen, sind gelb. Für Proteus mirabilis Bei rosa Kolonien mit oder ohne schwarzes Zentrum wird ein knappes Wachstum erwartet. Schließlich wird die Gattung Klebsiella als gelbe Kolonien wachsen.

Schlussbetrachtungen

Der XLD -Agar wird in den Bakteriologie -Labors sehr verwendet.

Rall and Collaborateure (2005) in ihrer Arbeit mit dem Titel "Bewertung von drei Anreicherungsbraten und fünf soliden Medien zur Erkennung von Salmonellen in Geflügel" zeigte, dass die 3 klassischen Medien (Bright Green Agar, SS Agar und Agar XLD), Agar XLD (Bright Green Agar, SS Agar XLD) zeigten erhielt die beste Wiederherstellungsrate.

Die Erholungsprozentsätze waren folgende: 13.8% für hellgrüne Agar, 27.6% für SS und 34.5% für xld. Es wurde nur durch chromogenes Medienagar Rambach mit 48% erholt und Chromagar mit 79 übertroffen.3%.

Verweise

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