Peptonada Foundation, Vorbereitung und Verwendung

Er Peptonada Wasser Es ist ein Mittel zur Flüssiganreicherung, nicht selektiv, hauptsächlich als Verdünnung von Lebensmittelproben oder anderen Materialien. Dies bedeutet aus chemischer Sicht sehr einfach, es enthält Pepton aus Fleisch, Natriumchlorid und Wasser.

Es hat einen gewissen Ernährungswert, der die Anreicherung der Probe ermöglicht. Wenn Bakterien angeschlagene Bakterien gibt, hat dieses Medium die Leistung, die Lebensfähigkeit zu reparieren. Es ist besonders nützlich bei der Wiederherstellung von Bakterien zur Familie Enterobacteriaceae.

Peptonada Wasser in Gläser. Quelle: MSC. Marielsa Gil

Bei der Erholung von Salmonellas wird die Verwendung der gepufferten Peptonada -Wasservariante empfohlen. Dies dient als Mittel zur Anreicherung der Probe, in diesem Fall enthält sie andere Elemente wie Dysótic-Phosphat und Dipotium-Phosphat.

Normalerweise bereitet Peptonada Wasser den neutralen pH -Wert vor, es gibt jedoch andere Varianten, bei denen der pH -Wert 8,5 ± 0,2 (alkalisch) erforderlich ist, da die zu isolierten Bakterien alkalophil sind Vibrio Cholerae.

Andererseits kann dieses Medium als Basismedium für Kohlenhydratfermentationstests verwendet werden.

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Basis

Peptonas liefern die Nährstoffe, die für die bakterielle Entwicklung erforderlich sind, insbesondere Stickstoff- und Kette -Aminosäuren, während Natriumchlorid das osmotische Gleichgewicht beibehält.

Darüber hinaus ermöglicht das Medium die Verbreitung, Homogenisierung und Reparatur von Bakterienzellen, die durch Einreichung von industriellen Prozessen beschädigt wurden.

Als Verdünnungsmittel ist ideal und ersetzt die physiologische Lösung (SSF) oder die Phosphatdämpfungslösung (PBS) effektiv.

Das Bakterienwachstum wird durch die Beobachtung der Trübung derselben deutlich.

Vorbereitung

Hausgemachte (nichtkommerzielle) Vorbereitung

Wiegen Sie 1 gr Pepton und 8,5 g Natriumchlorid, löst sich in 1 Liter destilliertem Wasser auf. Der pH -Wert muss auf 7,0 eingestellt werden. Dazu können Sie Natriumchlorid 1 N verwenden.

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Vorbereitung mit kommerziellem Medium

15 g dehydriertes Medium wiegen und in einem Liter destilliertem Wasser auflösen. Homogenisiere die Mischung. Bei Bedarf wird die Mischung 1 Minute gekocht, um die Gesamtlösung zu unterstützen. Servieren Sie nach Bedarf in 100 ml Gläser oder 10 ml Röhrchen. Autoklavar bei 121 ° C für 15 Minuten.

Kühl und im Kühlschrank verwenden. Der endgültige pH -Wert des Mediums beträgt 7,2 ± 0,2.

Die Farbe des dehydrierten Mediums ist leicht und vorbereitet Beige ist klarbernnd.

Vorbereitung auf Fermentationstests

Zu der vorherigen Herstellung - nach der Sterilisierung - sollte Kohlenhydrat zu einer endgültigen Konzentration von 1%sowie dem Andrade -Indikator (Säurefuchsin) oder rotes Phenol (0 (0) hinzugefügt werden.018 g/l). Die Röhrchen sollten eine Durham Bell zur Beobachtung der Gasbildung platziert werden.

Andere Peptonada -Wasservarianten

-Gepuffertes Peptonada -Wasser

Diese enthält enzymatisches Kaseinhydrolyz, Natriumchlorid, dihydrogenes Phosphat von Kalium und Wasserstoff -Natriumdodecahydrat -Natriumphosphat. Der endgültige pH -Wert beträgt 7,0 ± 0,2.

Zum Vorbereiten 20 g des dehydrierten Mediums wiegen und in 1 Liter destilliertem Wasser auflösen. Ungefähr 5 Minuten lassen. 1 Minute bis vollständig aufgelöst werden.

Gießen Sie über ausreichende Gläser nach Bedarf über. Sterilisieren Sie mit dem Autoklav bei 121 ° C 15 Minuten.

-Alkalisches Peptonada -Wasser

Wiegen Sie 25 g des dehydrierten Mediums und löst sich in 1 Liter Wasser auf. Fahren Sie wie oben beschrieben fort. Der pH liegt zwischen 8,3 und 8,7.

Verwenden

Das Inokulum wird durchgeführt, indem die Probe direkt platziert wird.

Es wird verwendet, um die Proben zu verdünnen, insbesondere wenn vermutet wird, dass möglicherweise beschädigte Bakterien vorliegen. Im Allgemeinen betragen Verdünnungen 1:10 und 1: 100.

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Es wird 24 Stunden in Aerobiose bei 35-37 ° C inkubiert.

Stuhlproben

Für Stuhlproben auf der Suche nach Salmonellen wird die Verwendung von gepuffertem oder gepuffertem Wasser als Mittel für die Enrique empfohlen.

Gehen Sie dazu wie folgt vor:

Wenn die Kot gebildet werden, um 1 g Probe zu nehmen. Wenn sie flüssig sind, nehmen Sie 1 ml Kot und hängen in einem Röhrchen mit 10 ml gepuffert. Laden Sie im Fall von Rektalströmen das im Tupfer im Tube enthaltene Material mit peptonada gepuffertem Wasser herunter.

In allen Fällen die Probe sehr gut mischen und homogenisieren.

18 bis 24 Stunden bei 37 ° C inkubieren. Anschließend subkulturell in einer Anreicherungsbrühe als Selenito-Brühe Cystin oder Tetrapationatbrühe bei 37 ° C für 18-24 Stunden mehr. Schließlich wachsen in selektiven Medien für Salmonellen wie Agar SS, Agar XLD, Heektoen Agar unter anderem.

Lebensmittelproben

Peptonada Wasser wird als Anreicherung oder als einfaches Verdünnungsmittel verwendet, aber wenn Salmonellenarten gesucht werden.

Gehen Sie in Lebensmitteln wie folgt vor:

Für feste Lebensmittel, die 25 g der Probe und für flüssige Lebensmittel 25 ml derselben messen. Legen Sie diesen Teil in Gläser mit 225 ml Peptonada Wasser. Mischen und homogenisieren die Probe.

Wenn vermutet wird, dass die mikrobielle Last hoch ist, können serielle oder dezimale Verdünnungen durchgeführt werden, um die Anzahl der Kolonien zu erleichtern, die Einheiten bilden (UFC).

Die Anzahl der Verdünnungen hängt von der Art der Stichprobe und der analytischen Erfahrung ab.

Wenn im Gegenteil vermutet wird, dass die mikrobielle Last sehr niedrig ist, ist es nicht erforderlich, Verdünnungen durchzuführen. Anschließend subjektiv in selektiven Medien.

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Im Falle von Lebensmitteln aus dem Meer, wie z. B. Meeresfrüchte, fisch unter anderem auf der Suche nach Vibrio Cholerae oder andere Arten von Vibrio, Peptonada -Wasser, eingestellt auf pH 8,5 (alkalisches Peptonada -Wasser), sollte verwendet werden (alkalische Peptonada).

QA

Von jedem vorbereiteten Grundstück muss man zwei Röhrchen inkubieren, ohne 24 Stunden bei Aerobiose bei 37 ° C zu impft. Die Zeit ist vorbei, Trübung oder Farbänderung sollte nicht beobachtet werden.

Bekannte Kontrollen können auch verwendet werden, um ihre Wirksamkeit zu bewerten:

Hierzu können Sie die folgenden Bakterienstämme verwenden: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 1428, Salmonella Enteritidis ATCC 13076.

In allen Fällen wird eine zufriedenstellende mikrobielle Entwicklung erwartet, die durch die Trübung der Umwelt beobachtet wird.

Einschränkungen

-Das dehydrierte Medium ist sehr hygroskopisch und muss daher von Feuchtigkeit ferngehalten werden.

-Das Medium sollte nicht verwendet werden, wenn eine Art von Verschlechterung beobachtet wird.

-Das dehydrierte Kulturmedium sollte zwischen 10 und 35 ° C gehalten werden

-Das vorbereitete Medium muss gekühlt gehalten werden (2-8 ° C).

Verweise

1. Camacho A, Giles M, Ortegon A, Palao M, Serrano B und Velázquez oder. Techniken zur mikrobiologischen Analyse von Lebensmitteln. 2009, 2. Aufl. Chemiefakultät, Unam. Mexiko. Version für Handbuch und Dokumente Administrator (AMYD) der Fakultät für Chemie, Unam 1. Verfügbar unter: http: // depa.Fquim.Unam.mx
2. Britania Laboratories. Gepuffertes Peptonada -Wasser. 2015. Erhältlich bei: Britanialab.com
3. Neogen Laboratorien. Peptonada Wasser. Erhältlich bei: Foodsafety.Neogen.com
4. Britania Laboratories. Peptonada Wasser. 2015. Erhältlich bei: Britanialab.com
5. Merck Laboratories. Peptonada pufferte Wasser. Erhältlich bei: Merckmillipore.com
6. Conda Pronadisa Laboratorien. Alkalisches Peptonada -Wasser. Erhältlich bei: Condalab.com
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologische Diagnose von Bailey & Scott. 12 ed. Pan -American Editorial s.ZU. Argentinien.