Selenito -Brühe Was ist, Foundation, Vorbereitung, verwendet

Er Selenito -Brühe Es ist ein selektives flüssiges Kulturmedium. Es wurde von Leifson zur Anreicherung von Proben entworfen.

Diese Medien erfüllt die Anforderungen der American Public Health Association (APHA) und wird daher für die Untersuchung der Anwesenheit von Salmonella in Stuhlproben, Urin, flüssigen oder festen Lebensmitteln, Wasser, unter anderem akzeptiert.

Selenito -Brühe. Quelle: Foto des MSC -Autors aufgenommen. Marielsa Gil

Die chemische Zusammensetzung, die die Gewinnung dieser Mikroorganismen bevorzugt und wiederum das Wachstum anderer hemmt. Es ist hauptsächlich giftig für die meisten Bakterien, die zur Familie Enterobacteriae gehören. Es ermöglicht jedoch auch die Wiederherstellung von Shigella -Stämmen und hemmt das Wachstum von Pseudomonas und Proteus nicht.

Es besteht aus wasserfreiem Natriumwasserstoff -Selen, wasserfreiem Natriumphosphat, Peptonas und Lactose. Es gibt auch eine Variante, zu der Cistina hinzugefügt wird, daher ihr Name Selenito-Cistina-Brühe.

Gegenwärtig wird die Verwendung von Selenito-Cistin-Brühe bevorzugt, da ein höherer Prozentsatz der Salmonellenwiederherstellung dem mit anderen selektiven Mitteln mit demselben Zweck beobachtet wird.

Basis

Die in der Brühe enthaltenen Peptons dienen als Nährstoffe für die gute Entwicklung von Mikroorganismen. Salmonellenstämme verwenden Peptones als Quelle für Stickstoff, Vitamine und Aminosäuren.

Laktose ist fermentierbares Kohlenhydrat, während Natriumselenit die Inhibitorsubstanz ist, die das Wachstum von Gram -positiven Bakterien und die meisten Bakterien in der Darmflora, insbesondere der Enterobacteriae -Familie, verlangsamt. Natriumphosphat ist der Stoßdämpfer, der den mittleren pH -Wert stabilisiert.

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Bei der Variante der Selenito-Brühe, die L-Cistin enthält, ist diese zusätzliche Verbindung ein Reduktionsmittel, das die Toxizität des Selenits minimiert und die Wiederherstellung von Salmonellen erhöht.

Vorbereitung

-Selenito -Brühe

Wenn Sie die Komponenten der Mischung haben, können Sie wiegen:

4 g wasserfreies Natriumwasserstoff.

10 g wasserfreies Natriumphosphat.

5 gr Pfectones.

4 g Laktose.

Lösen Sie die Verbindungen in 1 Liter sterilem destilliertem Wasser. Es kann leicht erhitzt werden, um sich in seiner Gesamtheit aufzulösen.

Einige Laboratorien enthüllen das Medium 10 Minuten lang in Fluente Dampf, um es zu sterilisieren, da Autoklave nicht verwendet werden sollte. Wenn das Medium sterilisiert ist, kann es bis zu seiner Verwendung im Kühlschrank gelagert werden.

Es kann auch vorbereitet werden, ohne sterilisieren und 10 bis 15 ml an sterile Testrohre servieren.

In diesem Fall sollten Sie sofort stehen lassen und verwenden. Da das Medium nicht steril ist, kann es nicht für die spätere Verwendung in einem Kühlschrank gespeichert werden.

-Kommerzielle Medienvorbereitung

Wenn das Handelsmedium verfügbar ist, 23 g des dehydrierten Mediums und in einem Liter steriler destilliertes Wasser gelöst. Kurz erhitzen, um sich aufzulösen. In Autoklaven nicht sterilisieren. Aseptisch 10 oder 15 ml in sterilen Testrohre servieren.

Der endgültige pH -Wert des Mediums muss 7,0 ± 0,2 betragen.

Es ist zu beachten.

Selenito-Cistin-Brühe Variante

Es enthält die gleichen Selenitbratenverbindungen, aber 10 mg Cystina werden zugegeben. Der Rest des Verfahrens ist genau das gleiche wie oben beschrieben.

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Anwendungen

Dieses Medium ist besonders in epidemiologischen Studien zu verwenden, in Fällen, in denen sich die Krankheit nicht in ihrem akuten Stadium, asymptomatischen Patienten oder gesunden Trägern befindet.

Die Isolierung der geschlechtsspezifischen Salmonellen ist normalerweise schwierig, da sie die Proben normalerweise kurz. Kurz gesagt.

Andererseits ist der Rohstoff, mit dem verarbeitete Lebensmittel häufig vorbereitet sind.

Daher werden die im Rohstoff vorhandenen Salmonellas durch die Einreichung des Produkts in die oben genannten industriellen Prozesse misshandelt. Ebenso können bei klinischen Proben wie Kot Stämme schwach sein, wenn sie von Patienten stammen, die mit Antibiotika behandelt wurden.

Daher muss jede Probe des Vorhandenseins von Salmonellen in der Lactosado -Brühe voranreichen und anschließend in Selenito -Brühe angereichert, um seine Erholung in den selektiven Medien wie SS -Agar, Xilosa -Agar, de -kopolatisches Lysin (XLD) zu optimieren (XLD) , Hoktoen enteric (er) und grün Apar -Brillante unter anderem.

Gesät

Für Stuhlproben nehmen Proben 1 g Probe und hängen in einem Röhrchen mit 10 bis 15 ml Selenito -Brühe auf. Wenn die Kot flüssig sind, nehmen Sie 1 ml und hängen Sie in der Brühe auf. Laden Sie für Rektal -Tupfer das Tupfermaterial in die Brühe herunter.

In festen Lebensmitteln nehmen Proben 1 g und hängen in der Selenito -Brühe auf.

In flüssigen Lebensmitteln in gleichen Teilen mit Doppelkonzentrations -Selenitbrühe mischen.

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Für Urinproben müssen Sie zentrifizieren, den Überstand verwerfen, das gesamte Sediment nehmen und in der Selenito -Brühe aufheben.

Die Brühen bei 37 ° C werden 24 Stunden lang Inkubation inkubiert. Das Bakterienwachstum wird durch Trübung belegt. Eine zusätzliche Röhre pro Probe kann auch zum Inkubieren von 42 ° C einbezogen werden. Anschließend selektive feste Medien aus der Selenito -Brühe säen.

QA

Für die Sterilitätskontrolle wird 37 ° C 24 Stunden lang eine Selenito -Brühe jedes Los inkubiert, ohne zu impft. Es wird erwartet, dass es keine Trübung gibt, keine mittlere Farbänderung.

Um die ordnungsgemäße Funktion des Mediums zu steuern, können bekannte Stämme verwendet werden, wie z

Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028,  Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 und Proteus mirabilis ATCC 43071.

Die erwarteten Ergebnisse sind:

• Für die ersten drei Bakterienstämme muss das Wachstum zufriedenstellend sein.
• Für Escherichia coli Partielle Hemmung.
• Für Proteus mäßiges Wachstum.

Einschränkungen

Die halbe Selenito -Brühe ist für menschliche Haut giftig, daher sollte direkter Kontakt vermieden werden.

Verweise

1. Britania Laboratories. Selenito -Brühe. Erhältlich bei: Britanialab.com
2. Neogen Laboratorien. Selenito -Brühe. Erhältlich bei: Foodsafety.Neogen.com