Tripticaseína Soja Brühe Was ist, Foundation, Vorbereitung, verwendet

Er Tripticaseína Sojabrühe Es ist ein flüssiges Kulturmedium, sehr nahrhaft und nicht selektiv. Aufgrund seiner großen Vielseitigkeit ist es eines der am häufigsten verwendeten flüssigen Kulturmedien im mikrobiologischen Labor.

Es ist auch unter dem Namen Triptic Soja Soja bekannt Tryptic bin ich Brühe oder CST). Seine Verwendungen sind aufgrund ihrer Zusammensetzung sehr unterschiedlich. Es besteht aus Triptein, Pepton aus Sojabohnen, Natriumchlorid, Dipotium und Glukosephosphat.

Soja -Soja -Tripticaseína mit einem Stamm von Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, wo die Pigmentproduktion beobachtet wird. Quelle: Foto des MSC -Autors aufgenommen. Marielsa Gil.

Es ist in der Lage, klinisch wichtige pathogene Bakterien zu reproduzieren, einschließlich solcher, die aus dem Standpunkt der Ernährung und anaeroben Bakterien anspruchsvoll sind. In diesem Medium können sich auch einige opportunistische und Schadstoffpilze entwickeln.

Aufgrund seiner hohen Ernährungsleistung weist es eine hohe Empfindlichkeit zur Erkennung mikrobieller Kontamination auf, aus diesem Grund wurde es vom USDA Animal and Plant Health Inspection Service für die mikrobiologische Analyse von Impfstoffen ausgewählt.

Ebenso erfüllt die Tripticaseína Soja -Brühe den Anforderungen der verschiedenen Pharmakopoer (Europäische EP, japanische JP und nordamerikanische USP) für die mikrobiologische Untersuchung von Produkten auf industrieller Ebene wie Kosmetik und Lebensmittel.

Auf der anderen Seite ist es erwähnenswert, dass dieses Medium trotz seiner großen Verwendung relativ wirtschaftlich ist und für die meisten mikrobiologischen Labors erschwinglich ist. Darüber hinaus ist es sehr einfach zuzubereiten.

Basis

Triptein, Pepton und Glukose bieten wesentliche Nährstoffeigenschaften, um es zu einem idealen Medium für die schnelle mikrobielle Entwicklung zu machen.

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Ungefähr 6 bis 8 Stunden Inkubation können Sie das Wachstum in den meisten Mikroorganismen bereits zu schätzen wissen. Es gibt jedoch langsame Wachstumsstämme, die die Tage dauern können, um zu wachsen.

Natriumchlorid und dipotasisches Phosphat wirken als osmotisches und pH -Regulatorgleichgewicht. Das Vorhandensein von Wachstum zeigt sich durch das Auftreten von Trübung in der Mitte; Wenn es kein Wachstum gibt, bleibt das Medium durchscheinend.

Aufgrund seiner leichten Farbe ist es möglich, die Produktion von Pigmenten zu beobachten, wie das in dem Bild zu Beginn des Artikels gezeigten, was dem Pigment entspricht, das von erzeugt wird Pseudomonas aeruginosa. 

Vorbereitung

-Tripticaseína Sojabrühe

Um die Triptychon -Sojabrühe vorzubereiten, müssen 30 g dehydriertes Handelsmedium in einem digitalen Gleichgewicht abgewogen werden. Dann löst sich in einem in einem Fixola enthaltenen Liter destilliert.

Die Mischung bleibt 5 Minuten in Ruhe und nimmt anschließend eine Wärmequelle, um die mittlere Auflösung zu unterstützen. Es muss häufig beim Kochen pro 1 Minute aufgeregt werden.

Sobald es gelöst wurde, ist es nach Bedarf in Röhrchen der geeigneten Größe verteilt. Sie können Röhrchen mit Baumwollkappe oder Baquelita Tapas verwenden. Anschließend werden die Röhrchen 15 Minuten lang im Autoklav bei 121 ° C sterilisiert.

Der mittlere pH -Wert muss 7,3 ± 0,2 betragen

Es sollte berücksichtigt werden, dass die Farbe der dehydrierten Kultur beige klar ist und an einem trockenen Ort zwischen 10 und 35 ° C gelagert werden sollte. Während die vorbereitete Brühe leicht bernstein ist und im Kühlschrank (2 bis 8 ° C) gelagert werden muss.

-Tripticaseína Soja -Brüh Varianten

Eine modifizierte Tripticasein -Sojabrühe kann durch Hinzufügen von Gallensalzen und Novobiocin hergestellt werden, um dies für die Isolierung von selektiv zu tun UND. coli. Eine weitere Option für den gleichen Zweck besteht darin, die mit Vancomycin, Cephixim und Telurito (2,5 µg/ml) ergänzte Soja -Sojabrühe vorzubereiten.

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Andererseits kann mehr Glucose (0,25%) zur Tripticaseína -Sojabrühe hinzugefügt werden, wenn das Ziel die Bildung von Biofilmen stimuliert wird.

Verwenden

Es ist nahrhaft genug, um das Wachstum von anspruchsvollen oder nervigen Bakterien wie z Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp und Brucella sp, Keine Notwendigkeit, mit Blut oder Serum zu ergänzen.

Ebenso können sich einige Pilze in dieser Brühe entwickeln, wie z Candida albicans Komplex, Aspergillus sp Und Histoplasma capsulatum.

Darüber hinaus ist dieses Medium unter anaeroben Bedingungen ideal für die Wiederherstellung von Bakterien zum geschlecht.

Wenn 6,5% Natriumchlorid zugesetzt werden, kann es für das Wachstum von Enterococcus und anderen Streptokokken der Gruppe D verwendet werden.

Auf Forschungsebene war es in verschiedenen Protokollen sehr nützlich, insbesondere in der Untersuchung von Biofilmen oder Biofilmen, die Bakterien bilden. Es wird auch verwendet, um die 0,5% MAC -Farland -Bakteriensuspension vorzubereiten.

In diesem Fall werden 3 bis 5 Kolonien ähnlicher Aussehen in 4-5 ml Sojabrofik-Tripticasein genommen und emulgiert. Dann wird es 2 bis 6 Stunden bei 35-37 ° C inkubiert und passt anschließend mit steriler Kochsalzlösung zur gewünschten Konzentration an. Tripticasein Soja -Wakes sollte nicht zwischen 18 und 24 Stunden Inkubation verwendet werden.

Gesät

Die Probe kann direkt gesät werden oder reine Kolonien, die aus selektiven Mitteln entnommen werden. Das Inokulum muss klein sein, um das Medium vor der Inkubation nicht zu trüben.

Normalerweise wird es 24 Stunden lang bei 37 ° C in der Aerobiose inkubiert, aber diese Bedingungen können je nach Mikroorganismus variieren, der gesucht wird. Es kann auch unter Anaerobiose -Bedingungen bei 37 ° C für mehrere Tage bei Bedarf inkubiert werden. Zum Beispiel kann es bei anspruchsvollen Mikroorganismen oder einem langsamen Wachstum für bis zu 7 Tage inkubiert werden.

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In der mikrobiologischen Analyse von pharmazeutischen Substanzen - wie Impfstoffe - sind Protokolle strenger. In diesen Fällen wird die Brühe ohne Wachstum erst ausgeschlossen, wenn sie 14 Tage kontinuierlicher Inkubation erfüllt.

QA

Von jedem vorbereiteten Grundstück sollten 1 oder 2 Röhrchen inkubiert werden, um seine Sterilität zu demonstrieren. Muss ohne Veränderung bleiben.

Sie können auch bekannte Stämme säen, um Ihr Verhalten zu bewerten. Unter den Stämmen, die verwendet werden können, sind:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 oder 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.

In allen Fällen muss das Wachstum unter den Atmosphäre und angemessene Temperatur für jeden Mikroorganismus zufriedenstellend sein.

Einschränkungen

-Die Glukosefermentation bewirkt den Abstieg des mittleren pH -Werts durch Säureproduktion. Dies kann für das Überleben einiger Säure -sensitiver Mikroorganismen ungünstig sein.

-Es wird nicht für die Aufrechterhaltung von Stämmen empfohlen, da zusätzlich zu Säure Bakterien nach einigen Tagen Abgasnährstoffe mit der daraus resultierenden Ansammlung toxischer Substanzen, die die unwirtliche Umgebung machen.

-Sie müssen sich um alle Sterilitätsprotokolle kümmern, da die Brühen leicht verunnetbar sind.

-Nach der Vorbereitung der Tripticasein -Sojabrühe sollte nicht versucht werden, Brühe für ein anderes steriles Röhrchen zu übertragen, da diese Art von Manöver sehr anfällig für Verunreinigungen ist.

Verweise

1. Britania Laboratory. Tripteine ​​Sojabrühe. Erhältlich bei: Britanialab.com
2. MCD -Labor. Tripticaseína Sojabrühe. Erhältlich bei: elektronische Systeme.com
3. Neogen Labor.  Triptychon -Soybrühe. Erhältlich bei: Foodsafety.Neogen.com