SIM Foundation, Vorbereitung und verwendet

Er Sim Medium Es handelt. Es besteht aus Triptein, Pepton, Eisensulfat, Ammoniumsulfat, Natriumthiosulfat und Agar.

Dieses Medium ermöglicht die Ausführung von drei wichtigen Tests: die Produktion von Schwefelwasserstoff (H)₂S) Die Bildung von Indol und Motilität von dort kommt die Akronym SIM. Aufgrund seines großen Nutzens kann es in einem Bakteriologie -Labor nicht fehlen.

ZU. Middle Sim Commercial B. SIM H2S (-), Indol (-) und Motility (+) und SIM H2S (+), Indol (-), Motility (+) Test-Test. Quelle: a. Foto des Autors MSC aufgenommen. Marielsa Gil b. Mfloayza [CC BY-SA 3.0 (https: // creativecommons.Org/lizenzen/by-sa/3.0)]]

Im Gegensatz zu anderen Medien muss dies halbsolid sein, um die Fähigkeit der Bewegung festzustellen, die einige Bakterien haben. In diesem Sinne funktioniert dieser Test sehr gut für Enterobakterien, jedoch nicht für nicht -fermentarische negative Bacilli, bei denen andere Methoden bevorzugt werden, wie z. B. den anstehenden Abfall.

Das SIM -Medium ermöglicht es, bestimmte spezifische Eigenschaften zu unterscheiden, die einige Bakterien in Bezug auf andere charakterisieren. Zum Beispiel Escherichia coli unterschieden sich durch H₂S (-), Indol (+) und Motilität (+), während Proteus mirabilis es SH₂S (+), Indol (-), Motilität (+).

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Basis

Es ist eine Kultur bedeutet, die als differentiell angesehen wird, da ihre Verwendung es schafft, zwischen den Mikroorganismen zu unterscheiden, die in der Lage sind, Wasserstoffsulfid von denen zu erzeugen, die dies nicht tun. Es hebt auch diejenigen hervor, die Indol aus dem Tryptophan von denen bilden, die sich nicht bilden, und unterscheidet schließlich die beweglichen Bakterien von unbeweglichen.

Energiequelle

Wie alle Kulturmittel verfügt es über Elemente, die die notwendigen Nährstoffe liefern, damit sich nicht absorbierende Mikroorganismen entwickeln können. Diese Elemente werden durch Peptones und Triptein dargestellt.

Die Entwicklung des Mikroorganismus in der Umwelt ist wichtig, um das Vorhandensein oder Fehlen der Merkmale zu beobachten, die dies bedeutet, zu bewerten.

Wasserstoffsulfidproduktion

Der Buchstaben des Akronyms SIM bezieht sich auf die Produktion von Wasserstoffsulfid (H)₂S). Bakterien, die in der Lage sind, Wasserstoffsulfid zu bilden.

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Sobald der H gebildet ist₂S -Gas farblos -Dies reagiert mit Eisensalz in der Mitte, bildet Eisensulfid, deutlich sichtbar (schwarzer Niederschlag). Die Bakterien, die sich nicht bilden₂S, hinterlassen Sie das ursprüngliche Farbmedium (beige).

Das Vorhandensein von schwarzem Niederschlag kann die Interpretation der Motilität behindern. Es ist jedoch bekannt, dass die meisten HT -produzierenden Enterobakterien₂S sind positive Motilität wie Salmonellen, Proteus und Citrobacter. Darüber hinaus weist der schwarze Niederschlag, der fast das gesamte Medium abdeckt, eine positive Motilität auf.

Indolbildung

Der zweite Buchstabe des Akronym SIM ist das "I", der die Bildung von Indol darstellt.

In diesem Sinne erfüllt Tripteine ​​nicht nur eine Quelle des Nährstoffs. Dieses Pepton ist reich an einer Aminosäure namens Tryptophan. Daher kann es Bakterien zeigen, die Triptofanase produzieren.

Dieses Enzym ist für Clivar für die Triptophan -Aminosäure verantwortlich, mit der daraus resultierenden Bildung von Indol (farblose Substanz), Pyruvsäure und Ammonium.

Deshalb ist es notwendig, diese Reaktion zu zeigen. Eine der beiden reagiert mit dem Indol und bildet einen rot-fucsienförmigen Ring auf der Oberfläche des Agars. Wenn der Farbring von Fuchsia erscheint, wird der Indol -Test als positiv interpretiert.

Die Bakterien, die dieses Enzym nicht besitzen, bilden den Ring nicht und werden als negativer Indol -Test interpretiert.

Es ist wichtig zu beachten.

Motilität

Schließlich bedeutet der Buchstabe "m" des Worts Sim die Motilität. Um die Motilität zu bewerten, ist dieses Medium strategisch semi-solid, da dieses Merkmal von wesentlicher Bedeutung ist, um zu beobachten, ob es eine bakterielle Bewegung gibt oder nicht. Die Bakterien mit Flagellen sind diejenigen, die diesen positiven Test ergeben.

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Ein positiver Test wird nach Beobachtung der Trübung sowohl im anfänglichen Inokulum als auch im Umgang nachgewiesen. Während sich nicht mobile Bakterien auf der ersten Inokulumreise entwickeln.

Vorbereitung

Sim Medium

30 g dehydriertes Medium wiegen und in einem Liter destilliertem Wasser auflösen. Die Mischung bleibt 5 Minuten in Ruhe und wird dann bis zum Kochen erhitzt, häufig rührt es bis zu seiner vollständigen Auflösung.

Verteilen Sie die Mischung in Reagenzgläser mit Baumwolldeckel und autoklavieren Sie 15 Minuten bei 121 ° C. Entfernen Sie das Rack von Autoklavenrohre und lassen Sie sich in einer vertikalen Position festigen.

Für seine Erhaltung wird es bis zu seiner Verwendung im Kühlschrank gespeichert. Das vorbereitete Medium muss einen endgültigen pH von 7,3 ± 0,2 haben.

Bei der Inokulation des Mediums muss dies bei Raumtemperatur sein. Die Farbe des Mediums ist beige.

Kovacs Reagenz

Messen Sie 150 ml Amyl- oder Isoamyl- oder Butylalkohol. (Verwenden Sie einen der drei genannten).

10 g p-dimethylaminobenzaldehyd auflösen. Dann langsam 50 ml konzentrierter Salzsäure addieren.

Das Reagenzien ist farblos oder klar gelb ist. Es muss in der Bernsteinflasche aufbewahrt und in einem Kühlschrank gelagert werden. Verwenden Sie nicht, wenn Sie eine dunkelbraune Farbe nehmen. Das zeigt an, dass es beschädigt ist. Dieses Reagenz wird bevorzugt, wenn es um Enterobakterien geht.

Erlich Reagenz

Wiegen Sie 2 g p-dimethylaminobenzaldehyd und lösen. Halten Sie Kovacs Reagenz auf die gleiche Weise. Ehrlichs Reagenz wird mehr für nicht -fermentierende und anaeroben Bakterien verwendet.

Anwendungen

Das SIM -Medium wird in bakteriologischen Labors stark verwendet. Es hat einen Vorteil, dass bei der Identifizierung von Enterobakterien drei wesentliche Merkmale beobachtet werden können.

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Gesät

Der richtige Weg, um dieses Medium zu säen, besteht darin. Ein einzelner Longe muss erledigt werden. Die Punktion sollte nicht den Boden des Rohrs erreichen, das Richtige ist, nur zwei Dritte abzudecken.

Es ist nicht ratsam, das Inokulum zu wiederholen, da dies falsche Interpretationen positiver Motilität haben kann. Das inokulierte Medium wird in Aerobiose bei 37 ° C 24 Stunden lang inkubiert.

Sobald die Zeit vorbei ist, wird beobachtet, ob es eine Produktion von H gab oder nicht₂S und lesen Sie die Motilität. Schließlich wird das Indol offenbar.

Quelle: Koneman E, Allen S., Janda W., Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologische Diagnose. 5. ed. Pan -American Editorial s.ZU. Argentinien.

QA

Als Sterilitätskontrolle werden ein oder zwei Röhrchen ohne Inokulation in 37 ° C pro 24 Stunden inkubiert. Es wird erwartet, dass nach dieser Zeit keine Wachstums- oder Farbänderung vorliegt.

Als Qualitätskontrolle können Sie zertifizierte bekannte Stämme verwenden, wie z. B.: Escherichia coli ATCC 25922, Enterobacter aerogenes ATCC 13048, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Shigella Sonnei ATCC 29930, Proteus vulgaris ATCC 13315.

Die erwarteten Ergebnisse sind: Escherichia coli H₂S negativ, Indol und positive Motilität, Enterobacter aerogenes Nur positive Motilität, Salmonella typhimurium H₂S und positive Motilität mit negativem Indol. Proteus vulgaris Alles positiv, so lange wie Klebsiella pneumoniae Und Shigella Sonnei Alles negativ.

Einschränkungen

-Einige Stämme von Morganella Morganii, Unter anderem können Stämme aufgrund der Melaninproduktion ein bräunliches Pigment in diesem Medium erzeugen. Dies sollte nicht mit dem Eisen -Sulfid -Niederschlag verwechselt werden. In unerfahrenen Fachleuten kann diese Situation bei der Interpretation des H -Tests falsch positive Ergebnisse erzeugen₂S.

-Strenge aerobe Bakterien wachsen nur auf der Oberfläche des Röhrchens, was die Interpretation der Motilität behindert.

Verweise

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2. Neogen Laboratorien. Sim Medum. Erhältlich bei: Foodsafety
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6. Koneman E, Allen S., Janda W., Schreckenberger P., Winn W. (2004). Mikrobiologische Diagnose. 5. ed. Pan -American Editorial s.ZU. Argentinien.