Nefelometrie

Nefelometrie

Was ist Nefelometrie?

Der Nefelometrie Es besteht aus der Messung der durch Partikel (in Auflösung oder Suspension) verursachten Strahlung, wodurch die Leistung der Strahlung gemessen wird, die in einem anderen Winkel als der Richtung des Vorfalls verteilt ist.

Wenn ein suspendiertes Teilchen von einem Lichtstrahl erreicht wird, gibt es einen Teil des Lichts, der reflektiert wird, ein weiterer Teil absorbiert, ein weiterer abweichender und der Rest übertragen wird. Aus diesem Grund wird die Aufhängung, wenn das Licht auf ein transparentes Medium trifft, in dem eine Suspension von festen Partikeln vorliegt, trübe.

Was ist Nefelometrie?

Strahlungsdispersion durch Lösungspartikel

In dem Moment, in dem ein Lichtstrahl gegen die Partikel einer Suspensionssubstanz zusammenstößt, ändert die Ausbreitungsrichtung des Strahls seine Richtung. Dieser Effekt hängt von den folgenden Aspekten ab:

  1. Partikelabmessungen (Größe und Form).
  2. Suspensionseigenschaften (Konzentration).
  3. Wellenlänge und Lichtintensität.
  4. Entfernung vom einfallenden Licht.
  5. Erkennungswinkel.
  6. Mittlerer Brechungsindex.

Nefelometer

Das Nefelometer ist ein Instrument, das zur Messung von Partikeln in einer flüssigen Probe oder in einem Gas verwendet wird. So dass eine Photocelda in einem Winkel von 90 ° in Bezug auf eine Lichtquelle Strahlung durch die in der Suspension vorhandenen Partikel erkennt.

Ebenso hängt das Licht, das von den Partikeln zur Fotokilie reflektiert wird, von der Dichte der Partikel ab. Diagramm 1 präsentiert die grundlegenden Komponenten, aus denen ein Nefelometer besteht:

Abbildung 1. Grundkomponenten eines Nefelometers.

ZU. Strahlungsquelle

In der Nefelometrie ist es von entscheidender Bedeutung, eine Strahlungsquelle mit großer Lichtkraft zu haben. Es gibt verschiedene Arten, die von Xenonlampen und Quecksilberdampflampen, Halogenlaserlaserlaserlampen, Laserstrahlung, Laserstrahlung reichen.

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B. Monochromatorsystem

Dieses System befindet sich zwischen Strahlung und Eimerquelle, so dass die Inzidenz auf dem Strahlungseimer mit unterschiedlichen Wellenlängen im Vergleich zur gewünschten Strahlung auf diese Weise vermieden wird.

Andernfalls würden Fluoreszenzreaktionen oder Heizungseffekte in der Lösung Abweichungen von der Messung verursachen.

C. Eimer lesen

Es ist ein allgemein prismatischer oder zylindrischer Behälter und kann unterschiedliche Größen haben. Darin ist die untersuchte Lösung.

D. Detektor

Der Detektor befindet sich in einer bestimmten Entfernung (normalerweise sehr nahe am Eimer) und ist für die Erfassung der durch die Suspensionspartikel dispergierten Strahlung verantwortlich.

UND. Lesesystem

Es handelt sich im Allgemeinen um eine elektronische Maschine, die Daten empfängt, konvertiert und verarbeitet. In diesem Fall sind die Maßnahmen aus der durchgeführten Studie erhalten.

Abweichungen

Alle Messungen unterliegen einem Fehlerprozentsatz, der hauptsächlich angegeben wird:

  • Kontaminierte Eimer: In den Eimern verringert jeder Wirkstoff außerhalb der untersuchten Lösung, die sich innerhalb oder außerhalb des Eimers befindet, das strahlende Licht auf dem Weg zum Detektor (defekte Eimer, Staub, die an den Wänden des Eimers befestigt sind).
  • Interferenz: Das Vorhandensein einiger mikrobieller Verunreinigungen oder Trübungsstörungen verteilt die strahlende Energie und erhöht die Intensität der Dispersion.
  • Fluoreszenzverbindungen: Dies sind jene Verbindungen, die, wenn sie durch einfallende Strahlung angeregt werden, fehlerhafte und erhöhte Lesungen der Dispersionsdichte verursachen.
  • Reagenzerhaltung: Die unzureichende Temperatur des Systems kann nachteilige Bedingungen für die Untersuchung verursachen und das Vorhandensein von trüben oder steilen Reagenzien anregen.
  • Schwankungen der elektrischen Leistung: Um zu verhindern, dass einfallende Strahlung eine Fehlerquelle ist, werden Spannungsstabilisatoren für einheitliche Strahlung empfohlen.
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Metrologische Eigenschaften

Da die strahlende Leistung der nachgewiesenen Strahlung direkt proportional zur Massenkonzentration der Partikel ist, besitzen nelometrische Studien theoretisch eine größere metrologische Empfindlichkeit als andere ähnliche Methoden (wie Turbidimetrie).

Darüber hinaus erfordert diese Technik verdünnte Lösungen. Auf diese Weise können sowohl Absorptions- als auch Reflexionsphänomene minimiert werden.

Nephelometrieanwendungen

Nefelometrische Studien nehmen eine sehr wichtige Position in klinischen Labors ein. Die Anwendungen reichen von der Bestimmung von Immunglobulinen und der akuten Phase-, Komplement- und Gerinnungsproteine.

Erkennung immunkomplex

Wenn eine biologische Probe ein interessierendes Antigen enthält, wird sie (in einer Pufferlösung) mit einem Antikörper gemischt, um einen Immunkomplex zu bilden.

Die Nefelometrie misst die von der Antigen-Antikörper (AG-AC) -Reaktion verteilte Licht, und auf diese Weise werden die Immunkomplexe erkannt.

Diese Studie kann mit zwei Methoden durchgeführt werden:

Nephelometrie des Endpunkts:

Diese Technik kann zur Analyse des Endpunkts verwendet werden, bei dem der Antikörper der untersuchten biologischen Probe für zwanzig Stunden inkubiert wird.

Der AG-AC-Komplex wird unter Verwendung eines Nefelometers gemessen und die Menge an dispergiertem Licht wird mit derselben Maßnahme verglichen, die vor der komplexen Formation durchgeführt wird.

Kinetische Nefelometrie

Bei dieser Methode wird die Rate der komplexen Bildung kontinuierlich überwacht. Die Reaktionsgeschwindigkeit hängt von der Konzentration des Probenantigens ab. Hier werden die Maßnahmen gemäß der Zeit ergriffen, sodass die erste Maßnahme zum Zeitpunkt "Null" ergriffen wird (t = 0).

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Die kinetische Nefelometrie ist die am häufigsten verwendete Technik, da die Studie im Vergleich zum langen Zeitraum der Endpunktmethode in 1 Stunde durchgeführt werden kann. Das Dispersionsverhältnis wird kurz nach dem Hinzufügen des Reagens gemessen.

Vorausgesetzt, dass das Reagenz konstant ist, wird die Menge des vorhandenen Antigens als direkt proportional zum Änderungsverhältnis angesehen.

Andere Apps

Die Nefelometrie wird im Allgemeinen in der chemischen Qualitätsanalyse von Wasser, zur Klarheitbestimmung und zur Kontrolle der Prozesse seiner Behandlung verwendet.

Es wird auch verwendet, um die Luftverschmutzung zu messen, bei der die Partikelkonzentration aus der Dispersion bestimmt wird, die sie in einem einfallenden Licht produzieren.