Orceína Foundation und Vorbereitung

Der Orcein Es ist ein natürlicher lila Farbstoff, der aus verschiedenen Flechten entnommen wird, wie z, Rocella Tincoria Und Parella Lecanora meistens. Der Rocella Tincoria Es kommt auf dem afrikanischen und amerikanischen Kontinent vor, obwohl es durch andere Arten in Europa ersetzt werden kann.

Dieser Farbstoff wird seit der Antike in zytogenetischen Studien häufig verwendet. In diesem Sinne wurde die Herstellung von Orcein, die Essigsäure umfasst, von Lacourt 1941 eingeführt, sodass es zunächst die Lacourt -Technik bezeichnet wurde.

Chemische Struktur von Orcein- und Orcein -Lösung. Quelle: Wikipedia.Org/ uguenther bei.Wikipedia (dr. Guenther) [Public Domain]

Ebenso wurde es aufgrund seiner Einfachheit und niedrigen Kosten für die Herstellung von Lackmus (aus Flechten extrahierte Färben) und in histologischen Studien (Zell- und Gewebefärbung) verwendet.

Mehrere Studien haben diese Färbung in Kombination mit anderen Chemikalien wie ammoniakalischem Pikrocarminat und Essigsäure verwendet, um elastische Fasern bzw. Chromosomen zu färben. Derzeit bleibt Orcein in zytogenetischen Untersuchungen von Tieren und Gemüse verwendet.

Kürzlich haben Silva et al. 2017 verwendete diese Färbung erfolgreich, um die verschiedenen Veränderungen zu beobachten, die in den elastischen Fasern der Haut des Daumens bei chilenischen älteren Erwachsenen auftreten. Diese Studie ergab, wie sich Fasern des Daumen mit dem Altern verändert haben.

In diesem Sinne wurden die elastischen Fasern von Braun-Negruzco-Farbe bei Personen über 80 Jahre beobachtet. Während sie in den jüngsten (ab 60 Jahren) mit rotbraunen Braun gesehen werden können. Zytoplasma und andere Zellstrukturen werden gelblich grün.

Dies ermöglichte, das Vorhandensein und den Zustand der elastischen Fasern in Bezug auf ihre Disposition, Menge und Integrität zu bestätigen. Andererseits wurde auch darauf hingewiesen, dass Orcein unter anderem hilfreich ist, um Aneurysmen zu identifizieren und Arteritis zu diagnostizieren.

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Basis

Orcein ist Teil der Oxazingruppe von Farbstoffen und die Färbung basiert auf ihrer Affinität zur DNA. Der Farbstoff schließt sich der negativen Belastung dieses Moleküls an, die durch die Phosphatgruppe dargestellt wird. Deshalb sind Chromosomen lila gefärbt.

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Der Rest der Zellstrukturen hat jedoch eine weitere Farbe. Insbesondere im Fall von elastischen Fasern sind diese von einer rötlich -braunen Farbe, Zellkerne aus einem blauen violetten Blau, während Kollagen nicht gefärbt ist.

Daher wird Orcein verwendet, um Chromatin zu färben und Sex in einigen Fliegenfliegen zu unterscheiden. Ebenso können Kerne und einige von Hepatitis B -Antigenen erzeugte Lebereinschlüsse Farbe sein.

Orcein -Lösungen haben spezifische Funktionen bei der Färbung. Orcein a hat die Funktion, Zellmembranen zu weicher. In der Zwischenzeit ist Orcein B dafür verantwortlich, die Farbe für seine Adhäsion an Chromosomen zu vervollständigen.

Vorbereitung

1% Aceto-Orceine-Lösung

Zubereitung eines 1% igen Lösungs-Orceins.

Dann wird es ständig gemischt, um die Lösung zu homogenisieren, um später stehen zu lassen, bis sie abkühlt. Schließlich wird 4ºC in dunklen Gläser gespeichert. Diese Herstellung wurde von Flores 2012 zur Beobachtung der Reifungsphasen von Kuh -Oozyten verwendet.

In diesem Fall wird beispielsweise die Aceto-Orcein-Lösung am Gewebe, das zuvor in Acetic-Stanolsäure für 24 Stunden fixiert ist. Dieser Färbungsprozess wird 30 Minuten lang durchgeführt und anschließend wird der Stoff Verfärbung unterzogen.

Ebenso kann dies bei der Identifizierung von Organellen in mehrzelligen Geweben verwendet werden. In diesem Fall ist ein Abstrich der Mundschleimhaut mit einem Tropfen der Aceto-Orcein-Lösung gefärbt. Die Abdeckung wird auf das Blatt platziert und sofort kann der Zellkern mit seinen Unterstrukturen beobachtet werden.

Lacto-Proportion-Lösung Orcein 1%

Zusätzlich kann Orcein mit anderen Chemikalien wie Milchsäure und Propionsäure hergestellt werden. Dazu löst sich ein Gramm Orcein in einer Vorgebirge bei Raumtemperatur von 23 ml Milchsäure und 23 ml Propionsäure; Fertigstellung des Volumens mit destilliertem Wasser bis zu 100 ml.

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Mit dieser lacto-propionischen Lösung Orceína können Sie die verschiedenen Phasen der meiotischen Aufteilung von Pflanzenzellen sehen. In diesem Fall wird die zuvor bevorzugte und hydrolysierte Probe 15 Minuten in der Lacto-Propionic Orcein-Lösung platziert und erweitert dann das Gewebe in Gleitscheiben.

In der Duke -Studie 2016 über Polythen -Chromosomen wurde eine Herstellung von 2 Gramm Orcein, die in Essigsäure und 85%Milchsäure verdünnt ist, mit einer 65%igen Essigsäurelösung verwendet. Schließlich beobachtete er die Chromosomen in den Speicheldrüsen der Drosophila Melanogaster.

Orcein A und Orcein B

Es ist wichtig zu bedenken. Somit wird beispielsweise die Orcein -Lösung A 1n Salzsäure zur Beobachtung von Spaltungszellen zugegeben.

Während die Lösung von Orcein B letzt. Diese Technik stellt eine abgekürzte Methode zur Färbung dar und wird im Allgemeinen als Komplement zu Farbchromosomstrukturen verwendet.

Schlussbetrachtungen

Aus den letzten Jahrhunderten können Sie in Ländern des amerikanischen Kontinents als Argentinien Flechten erhalten, wie sie: Lecanora, Parmelia Und Nabelung, Welche sind großartige Quellen von Orcein. Auch europäische Gebiete wie die Kanarischen Inseln waren zu dieser Zeit große Hersteller der Orchilla.

Dies wurde in andere Städte desselben Kontinents wie Genua und Länder wie England, während Holland, exportiert. Also wurde diese Flechte anschließend reduziert, bis sie gerade löschen wollte.

Dies führte zum Orchilla, das durch andere Pflanzen mit Färbeneigenschaften ersetzt wurde. Die Entstehung von synthetischen Farbstoffen trug jedoch zur Fertigstellung dieser Lizenz oder der Quelle bei.

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Dies war dank Cocq möglich, der 1812 die Synthese des Orceins beschrieb, da dies weiß, dass dies durch eine phenolische Verbindung namens Orcinol synthetisiert wird. Trotzdem ist Natural Orcein immer noch der Favorit.

Dies kann darauf zurückzuführen sein, dass Orcinol eine sehr starke Geruchsmasse ist und deren längere Exposition zu Gesundheitsrisiken führen kann, wie z. B. den Verlust der Fähigkeit, Gerüche zu erkennen. Diese Schäden an der Hypophyse könnten sich von vorübergehend zu dauerhaft bewegen, je höher die Ausstellung.

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