Vorbereitung von Kulturmedien

Die Vorbereitung von Kulturmedien ist eine Methodik, um Mikroorganismen zu wachsen, um sie zu studieren

Was ist die Vorbereitung von Kulturmedien?

Der Vorbereitung von Kulturmedien Es ist eine Routinemethode, die in Laboratorien zum Wachstum der gewünschten Mikroorganismen verwendet wird. Die Kulturmedien sind feste, flüssige oder halbfeste Vorbereitungen, die alle notwendigen Nährstoffe für die Entwicklung einer mikrobiellen Population haben.

Im Allgemeinen sind die Mittel, um Mikroorganismen zu kultivieren.

Es gibt keine Möglichkeiten der allgemeinen oder universellen Kultur, da seine Zusammensetzung je nach den Bedürfnissen des Interessensmikroorganismus variiert. Einige Bakterien können in jedem Kulturmedium entwickelt werden, andere haben jedoch besondere Anforderungen.

Woraus besteht es?

Mikroorganismen wie Pilze und Bakterien können aufgrund ihrer mikroskopischen Größe nicht einzeln untersucht werden. Daher müssen sie in künstlichen Medien kultiviert werden, die den signifikanten Anstieg der Bevölkerung ermöglichen.

Wenn wir beispielsweise Bakterien untersuchen wollen, müssen wir ihnen die entsprechenden Bedingungen liefern, damit sie sich vermehren und eine Kolonie bilden können (die mit dem bloßen Auge beobachtet werden kann).

Die Vorbereitung von Kulturmedien variiert stark von der Art des Mikroorganismus, den Sie wachsen möchten. Vor der Vorbereitung ist es notwendig, die grundlegenden Ernährungsbedürfnisse des Arbeitsorganismus zu kennen.

Die am häufigsten verwendeten Komponenten, die in den Pflanzenmedien verwendet werden, werden nachstehend beschrieben, um eine allgemeine Vorstellung von seiner Vorbereitung zu haben:

Agar

Es wird in Pflanzen als Geliermittel verwendet und fügt hinzu. Das erste Verstopfungsmittel, das in der Medienpräparation verwendet wurde, war die Gelatine, aber 1883 wurde der Agar von W in die Welt der Bakteriologie eingeführt. Hessen.

Der bakteriologische Agar ist als Hauptkomponente ein Polysaccharid komplexer Auswirkungen, die aus Algen extrahiert werden. Diese Verbindung wird als Verdicker von gängigen Lebensmitteln wie Eis und Marmeladen verwendet.

Es ist aus mehreren Gründen ein sehr wertvolles Element in der Mikrobiologie. Hauptsächlich, da Mikroorganismen es nicht abbauen können.

Falls Sie ein festes Medium vorbereiten möchten, muss die Agarkonzentration etwa 1,5%betragen, während die Halbsolids von 0,3 bis 0,5%vorbereitet werden müssen.

Flüssigkeiten

Der Anbau von pathogenen Organismen braucht Körperflüssigkeiten, damit sie sich wie in ihrer natürlichen Umgebung entwickeln können.

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Aus diesem Grund wird ein vollständiges oder defibriertes Blut hinzugefügt. Die Flüssigkeit wird aus einem gesunden und, sobald sterilisierten Tier, im Kulturmedium hinzugefügt werden.

Auszüge

Sie werden aus verschiedenen tierischen Teilen (wie Fleisch oder Leber) oder Gemüse (Samen) erhalten und werden verarbeitet, um ein festes Konzentrat in Form von Nudeln oder Staub zu erhalten.

Am häufigsten sind die Extrakte von Hefe, Malz und Fleisch.

Peptonas

Diese organischen Verbindungen werden durch enzymatische oder Chemie von tierischen oder Pflanzengeweben erhalten. Ziel ist es, einen umfangreichen Gehalt in Aminosäuren hinzuzufügen, die die grundlegenden Einheiten von Proteinen sind.

Stoßdämpfer

Die "Puffer" oder Stoßdämpfungssysteme vermeiden plötzliche pH -Veränderungen und tragen dazu bei, den optimalen Bereich beizubehalten, den der Organismus toleriert.

Die meisten Organismen können einen pH -Wert von 7 richtig entwickeln, obwohl einige Bakterien alkalische Medien bevorzugen. Es gibt jedoch Bakterien, die den pH -Variationen zwischen den Werten von 6 und 9 widerstehen.

Bei pH -Sensitive Spezies wird Schäden nicht durch die übermäßige Menge an Wasserstoff oder Hydroxylionen erzeugt, sondern durch die Zunahme schwacher Säuren oder Basen, die in die Zelle eindringen können.

Ebenso werden pH -Indikatoren hinzugefügt, um es zu überwachen und Abweichungen zu vermeiden, die durch Fermentationen oder andere Prozesse verursacht werden.

Ziele

Das Hauptziel bei der Vorbereitung eines Kulturmedium. Die Kombination von effektiveren Komponenten und Nährstoffen, um die gewünschten Mittel zu erreichen.

Sowohl die Vorbereitung als auch die mittlere Speicherung sind von entscheidender Bedeutung, um ein erfolgreiches Wachstum zu gewährleisten, da diese Schritte von der Zusammensetzung der Umwelt und der Verfügbarkeit von Nährstoffen abhängen.

Es sollte berücksichtigt werden.

Daher muss jede dieser Variablen berücksichtigt und streng überwacht werden.

Arten von Medien

Basierend auf seiner Komposition

Basierend auf seiner Zusammensetzung gibt es drei Haupttypen von Pflanzen: natürliche oder empirische, halbsynthetische und synthetische oder chemische Mittel.

Natürlichen Umgebung

In natürlichen Medien ist die genaue Komposition unbekannt. Dazu gehören Zutaten wie Milch, verdünntes Blut, Pflanzensäfte, Extrakte und Infusionen von Fleisch und Peptones.

Aus wirtschaftlichen Gründen werden normalerweise niedrige Kostkomponenten hinzugefügt, wie Soja -Extrakt, Serum, Melasse usw.

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Halbsynthetische Medien

Es wird halbsynthetisch bezeichnet, wenn die Zusammensetzung derselben teilweise bekannt ist. Jedes Medium, das Agar enthält, ist ein halbsynthetisches Medium.

Unter ihnen haben wir unter anderem Dextrose-Kartoffel, Czapek-Dox-Agar, Haferflocken, Fleischpeptongriff.

Synthetisches oder chemisch definiertes Medium

In diesem Fall ist die Zusammensetzung des Mediums - wie für die Menge an Kohlenstoff, Stickstoff, Schwefel, Phosphor und jedem anderen Wachstumsfaktor völlig bekannt - völlig bekannt -.

Es ist sehr nützlich, wenn Sie reproduzierbare Ergebnisse für andere Forscher erzielen möchten.

Für die sogenannten "Mikroorganismen mit besonderen Wachstumsanforderungen" müssen Sie die erforderlichen Komponenten hinzufügen. Ein Beispiel für diesen Typ sind Lactobacillus.

Basierend auf der Art des Mikroorganismus

Auf die gleiche Weise gibt es eine weitere Klassifizierung für Kulturmedien, die auf der Art des Mikroorganismus basiert, der darin wachsen kann.

Nach diesem Prinzip haben wir Folgendes: Allgemeine Mittel, Anreicherung, selektive und Differentiale. Jeder wird unten beschrieben:

Allgemeine Mittel

Diese geben die Entwicklung einer Vielzahl von Mikroorganismen zu. Wenn ein Organismus besondere Bedingungen für sein Wachstum benötigt, kann er sich in dieser Art von Ernte nicht erfolgreich entwickeln.

Anreicherungsmedien

Die Anreicherung bedeutet, das Wachstum einer bestimmten Art von Mikroorganismus zu begünstigen, aber es wurde keine Substanz hinzugefügt, um zu verhindern, dass andere Arten von Mikroben darin wachsen.

Selektive Mittel

Sie suchen das spezifische Wachstum eines Mikroorganismus, nennen unter anderem Pilze, Bakterien und Protozoen. Dazu hemmen sie die Entwicklung anderer.

Um dieses Ziel zu erreichen, können sterbliche chemische Verbindungen für eine breite Gruppe von Mikroorganismen hinzugefügt werden und für den Körper des Interesses harmlos sind oder Energiequellen hinzuzufügen, die nur von der gesuchten Mikrobe assomilabel sind.

Selektive Medien werden verwendet, wenn medizinische Proben entnommen werden, um einige pathogene Mikroorganismen zu kultivieren. Hier ist es notwendig, das Wachstum von Pathogen zu begünstigen und die Entwicklung einer normalen mikrobiellen Flora des Patienten zu hemmen.

Wismutsulfitagar erlaubt beispielsweise nicht das Wachstum von grampositiven Bakterien und eine große Anzahl von Bakterien, die in der Magen -Darm -Hohlheit gefunden wurden.

Daher wird es verwendet, um die gramnegativen Bakterien zu kultivieren, die Typhus verursachen, Salmonella typhi, In Fäkalproben.

Unterschiedliche Mittel

Dieser Typ verwendet ein diagnostisches Merkmal des interessierenden Organismus (Besonderheiten seines Stoffwechsels), um sie gegen eine andere Art zu identifizieren, die im selben Medium wächst.

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Sowohl Differentialmedien als auch selektive Mittel sind im Bereich der klinischen Mikrobiologie und der öffentlichen Gesundheit sehr nützlich, da diese Disziplinen das Vorhandensein spezifischer Mikroorganismen im Zusammenhang mit Pathologien oder schlechten Hygienebedingungen erkennen müssen.

Sie können Indikatorsubstanzen in der Ernte hinzufügen, die der gesuchten Kolonie ein unverwechselbares Merkmal gewähren. Beispiel.

Wenn sich in diesen Medien eine Kolonie mit der Fähigkeit entwickelt, Laktose zu fermentieren und Aldehyde zu produzieren, können sie in einer besonderen Farbe beobachtet werden.

Schritte zur Vorbereitung von Kulturmedien

Derzeit kann der Anbau lyophilisiert gekauft werden. Daher wird die Vorbereitung erleichtert und nur das Produkt bleibt übrig.

Der Inhalt muss stark sein (unter Berücksichtigung der endgültigen Menge, die Sie vorbereiten möchten) und in destilliertem Wasser nach allen Produktindikationen in destilliertem Wasser gelöst werden.

Der Gehalt der flüssigen Medien muss zur anschließenden Sterilisation in die gewünschten Behälter (Petrischplatten, Röhrchen usw.) unterteilt werden.

Um das feste Medium zu verteilen, muss es mit einer Mikrowelle schmelzen oder das Material an ein Wasserbad senden. Der mittlere pH muss eingestellt werden.

Normalerweise wird der Agar in Reagenzgläser oder Petrischplatten verwendet. Wenn der Agar in einer geneigten Position mit dem geeigneten Winkel für die endgültige Anschlusskante diagonal ist, ist er als Flöte oder geneigte Pico -Röhrchen bekannt.

Wenn der Agar in einer völlig vertikalen Position verfestigt wird, erhält er den Namen "Deep".

Nach der Sterilisierung des Mediens - mit einem Autoklaven - ließen sie sie abkühlen. Diese müssen in einer Umgebung manipuliert werden.

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