Xantoprotische Reaktionsfundament, Verfahren, Verwendung

Der Xantoprotische Reaktion Es ist ein chemisches Verfahren, das zur Bestimmung des Vorhandenseins oder des Fehlens von aromatischen Aminosäuren wie Tyrosin und Tryptophan verwendet wird, die frei oder lösliche Proteine, Peptide oder Polypeptide bilden können.

Es wurde auch verwendet, um toxische Substanzen auf dem Blutniveau zu erfassen, die eine beruhigende Gruppe in ihrer Struktur enthalten. Dieser Test ist auch als Becher Xantoprotische Reaktion bekannt.

Positive xantoprotische Reaktionsquelle: Aus Video entnommen: https: // youtu.BE/GZGMBW5W4WO

Die Xantoprotikreaktion verwendet konzentrierte Salpetersäure, Wärme und ein neutralisierendes Alkali. Wenn, wenn die Reaktion neutralisiert wird, wird die gelbe bis orange Lösungslösung als positiv angesehen. Die beobachtete Färbung ist auf die Bildung von Stickstoffverbindungen zurückzuführen, die sich aus der Nitrifikation der Benzengruppen stammen.

Wenn Sie die Menge an Gesamtproteinen quantifizieren müssen, müssen andere Proteinbestimmungsmethoden wie Biuret verwendet werden.

Die xantoprotische Reaktion wird hauptsächlich verwendet, wenn Substanzen analysiert werden, auf die ihre chemische Zusammensetzung nicht bekannt ist. Im Allgemeinen ist diese Reaktion Teil einer Reihe von Tests, die dazu beitragen, die chemische Zusammensetzung einer bestimmten Substanz oder eines bestimmten Extrakts zu bestimmen. Deshalb wird es von Forschern häufig verwendet.

Andererseits wird Bechers Xantoprotische Reaktion verwendet, um phenolische und indolische Substanzen im Blut nachzuweisen, um das Auftreten einer Nephropathie vorherzusagen, bevor andere Parameter erhöht werden.

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Basis

Die Reaktion erkennt im Grunde das Vorhandensein der Benzenischen Gruppe sowohl in Aminosäuren als auch in Proteinen und Peptiden. Salpetersäure wirkt auf den Aminosäure -Bogenic -Ring, der ihn besitzt und phenolische Nitrocompositionen bildet.

Die Reaktion braucht Wärme, um ausgeführt zu werden, normalerweise wird ein Niederschlag gebildet, der das Medium woliert, was es milchig macht. Der Niederschlag kann weiß oder gelb sein. Schließlich erfordert es einen Alkalisierungsschritt, der die Farbe betont. Dafür wird eine Basis als 40% oder Ammoniak -Natriumhydroxid verwendet.

Die Reaktion wird als positiv interpretiert, wenn eine starke gelbe Färbung während des dunklen Erhitzens oder des orangefarbenen Prozesses durch Alkalisierung der Reaktion beobachtet wird. Die nachgewiesenen Aminosäuren sind hauptsächlich Tyrosin und Tryptophan.

Xantoprotische Reaktion. Quelle: http: // Esteroisomeras.Blogspot.com/2013/06/Charakterisierung der Proteine.Html

Im Fall von Phenylalanin ist es schwierig.

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Im Allgemeinen kann der Xantoprotiker durch den Hopkins-Cole-Test ergänzt werden, der Triptophan spezifisch identifiziert. Wenn der xantoprotische Test positiv ist und der von Hopkins-Cole negativ ist, wird das Vorhandensein von Tryptophan in dieser Lösung verworfen, was hauptsächlich von Tyrosin vorhanden ist. Ebenso kann es auch durch Millons Reaktion auf Tyrosinerkennung ergänzt werden.

Diese Reaktion kann auch bei Blutproben, Plasma oder unverändertem Serum zur Diagnose von URMIA oder Niereninsuffizienz verwendet werden. In diesem Fall wird der Nachweis von toxischen Substanzen (phenol und indolisch) aus Darmfäule ermittelt.

Diese Substanzen besitzen die Benzenische Gruppe und geben daher eine positive xantoprotische Reaktion, obwohl die reaktionären Substanzen weder eine Aminosäure noch ein Protein sind.

Verfahren

- Xantoprotische Reaktion für die Aminosäurerkennung mit aromatischen Gruppen

Legen Sie 1 ml der Problemprobe in ein sauberes und trockenes Testrohr.

-0,5 ml konzentrierter Salpetersäure hinzufügen.

-Inkubieren Sie die Mischung in einem Badezimmer von 70 ° C für 2 Minuten. Zuvor bereiten Sie das Maria -Bad auf die oben genannte Temperatur vor.

-Wenn Sie das Röhrchen aus dem Maria -Bad nehmen, ist es möglich zu beobachten.

-Die Lösung wird abgekühlt, indem kaltes Wasser an der Basis des Rohrs fallen ließ.

-Die Vorbereitung wird durch langsam (Drop durch Drop) eine 40% ige Natriumhydroxidlösung vorgesehen, bis ein Farbschock vorliegt.

-Wenn der Test positiv ist, wird in der Flüssigkeitsschnittstelle ein dunkelorange Ring gebildet.

-Wenn die Reaktion negativ ist, gibt es keine Farbbildung.

- Xantoprotische Reaktion zum Nachweis phenolischer und indolischer Substanzen im Blut

-Abgabe von 5 ccm Trichloressigsäure bei 20% über 5 cm³ venöses Blut, Plasma oder Serum, wobei letztere am meisten angegeben sind. Gut mischen und filtern.

Kann Ihnen dienen: Salpetersäure (HNO3)

-2 cc der Filterung werden eingenommen und mit 0,5 cm³ Salpetersäure gemischt. Dann wird es zum Kochen erhitzt, denn dies wird das Rohr direkt auf die Flamme des Feuerzeugs für 30 Sekunden gelegt. Kühlt mit Wasser ab und füge 1,5 Natriumchlorid bei 33% hinzu.

Es wird wie folgt interpretiert:

-Negatives Ergebnis: gelbliche Farbe.

-Positives Ergebnis (+) Zitronengelb.

-(++) Goldgelb.

-(+++) dunkelgelb bis braun

Es kann auch unter Verwendung einer referenziellen kolorimetrischen Skala von Auenrieth interpretiert werden, die aus verschiedenen Konzentrationen von Kaliumbicromato besteht. Dies wird in Verdünnungen von 10 in 10 aus einer Mutterlösung von 0,03874% hergestellt. Jedes Röhrchen repräsentiert einen Prozentsatz.

Interpretationsskalen

Es gibt zwei Interpretationsskalen, die als alter und modern bezeichnet werden. Die Normalwerte sind:

Alte Tabelle: zwischen 75 und 85%

Moderne Tabelle: zwischen 15 und 25%

Wenn sich die Farbe des Problemröhrchens in der Mitte zweier Musterrohre befindet, wird ein Durchschnitt zwischen beiden Maßnahmen erfolgen.

Die Kalium -Dichromat -Musterlösung wird wie folgt hergestellt: 7 wird gemessen.9 ml Kaliumdichromat bei 10 N und ist bis zu 100 ml in einem Aggorado -Ball bündig. Für Verdünnungen folgt es, wie es in der kolorimetrischen Tabelle von AutoNrieth gezeigt wird.

Kolorimetrische Tabelle der AutoNrieth. Quelle: Vásquez a. Xantoprotische Reaktion. Spanisches klinisches Magazin. 1949; 35 (5): 326-327. Erhältlich bei: Elsevier

Verwenden

Die Verwendung der Xantoprotikerreaktion ist Teil einer Reihe biochemischer Tests, die dazu beitragen, die chemische Zusammensetzung einer unbekannten Substanz zu kennen. Dieser Test trägt zur chemischen Analyse zum Nachweis von Proteinen bei, die Benzengruppen in ihrer Struktur enthalten.

Diese Reaktion wird von Forschern in verschiedenen Substanzstudien häufig verwendet.

In diesem Sinne verwendeten Vásquez-Jorge und Mitarbeiter diese und andere Reaktionen, um den Proteingehalt von Flüssigkeiten zu untersuchen, die aus der Mangroven-Osion extrahiert wurden (Crassostrea rhizophorae).

Ebenso verwendeten Rojas und Mitarbeiter (2009) eine Reihe von Tests, darunter die Xantoprotiker Reaktion, um Glycomacropéptide bei Ausfällen von Lactosueros de Ricotta zu analysieren.

Andererseits wurde Bechers Xantoprotiker durch Volhard modifiziert, um für andere Zwecke verwendet zu werden. In diesem Fall werden zum Nachweis von phenolischen und indolischen Substanzen, die viel früher (Wochen oder Monate) angehoben werden können.

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Diese giftigen Abfälle werden aus der Darmfäule von Nahrung gebildet.

Diese Substanzen sammeln sich im Blut an, wenn sie nicht ordnungsgemäß beseitigt werden, daher kann ein positiver Xantoprotiker die sofortige Festlegung von Nierenversagen selbst oder einen Zustand der Unerämie vorhersagen.

Entsprechend der Farbintensität können Sie bestimmen, wie fortschrittlich es ist. In diesem Fall ist der Test quantitativ.

Bei gesunden Menschen ergibt dieser Test eine leichte gelbe Farbe, die den normalen Spiegel von Tryptophan und Tyrosin entspricht, die im Blut liegen können.

Während bei Nierenpatienten die Xantoprotikerreaktion aufgrund des Vorhandenseins der folgenden Substanzen stark positiv darstellt: Phenol, Indol, Paracresol, aromatische Oxysäuren unter anderem.

Vorsichtsmaßnahmen

Dieser Test muss von ausgebildeten Fachleuten durchgeführt werden. Alle Standards der Biossicherheit sollten berücksichtigt werden, da die verwendeten Reagenzien Säuren und korrosive Grundlagen sind.

Wenn ein Zufall ein paar Tropfen Salpetersäure auf der Haut oder Nägel fallen, werden sie gelb, da beide Strukturen Proteine ​​enthalten. Darüber hinaus verursacht es auf Haut und Schleimhaut schwerwiegende Verbrennungen.

Wenn ein Kontakt mit der Haut auftritt, muss das zu folgende Protokoll bestehen, um den Bereich sofort mit Seife und Wasser für ungefähr 20 Minuten zu waschen.

Wenn Sie die Augen bespritzt, müssen Sie mit viel frischem Wasser waschen und versuchen, Ihre Augen offen zu halten.

Verweise

1. "Xantoprotica -Reaktion" Wikipedia, freie Enzyklopädie. 2. September 2019, 17:49 UTC. 21. Oktober 2019, 20:31 Wikipedia.org/
2. Vásquez-Jorge und Guerra-Molina L, Quintana-Tamayo J, Ramírez-Arzuaga J, Fernando-Ballesteros R, Vásquez-Jorge und. Physikochemische Charakterisierung und Proteingehalt von Flüssigkeitsextrakten von Mangrovenoption (Crassostrea Rhizophora). Kubanische Chemie, 2014; 26 (1): 66-74. Erhältlich in Redalyc.
3. Rojas E, Valbuena E, Torres G, García A, Piñero M, Galindo L. Isolierung und Leistung des GMP durch Lactosuero -Niederschlag mit Tricloressigsäure. Wissenschaftler. (Maracaibo) 2009; 19 (3): 295-302. Verfügbar bei: ve.Scielo.
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