Tincion of Capsula Foundation und Techniken

Der Kapselfärbung Es ist eine differentielle Färbungstechnik, die die Eigenschaft besitzt, die Polysaccharidstruktur hervorzuheben, die bestimmte Bakterien und Hefen umgibt, die als Kapsel bezeichnet werden. Es wird in klinischen Labors verwendet.

Es wird auch zum Unterrichten von Labors für die Demonstration dieser morphologischen Struktur für Studierende von Karrieren für Gesundheitswissenschaften wie: Medizin, Bioanalyse, Krankenpflege oder Zytotechnologie verwendet.

Klebsiella pneumoniae Abstrich mit Kapselfärbung gefärbt. Indische Tintenmethode mit Safranin. Quelle: A.А.В [Public Domain]

Es gibt mehrere einfache Techniken, um das Vorhandensein der Kapsel in den Mikroorganismen, die es besitzen.

Negative Färbung wird hauptsächlich in CSF -Proben verwendet, wenn das Vorhandensein von Hefe vermutet wird Cryptococcus Neoformans. Diese Hefe ist eine häufige Ursache für Meningitis.

Diese Technik verwendet Nigrosin oder chinesische Tinte und basiert darauf, einen Kontrast zwischen dem Vorbereitungsboden und der undurchdringlichen Kapsel des Mikroorganismus zu erzeugen. Der Hintergrund ist dunkel und die Kapsel ist farblos. Auf diese Weise wird diese Struktur hervorgehoben.

In Bezug auf die Anthony -Technik kann gesagt werden, dass sie hauptsächlich beim Unterrichten von Labors verwendet wird, um die Polysaccharidstruktur in Bakterien wie z Klebsiella pneumoniae, Streptococcus pneumoniae Und Meningokokken.

Die Verwendung dieser Technik für diagnostische Zwecke ist sehr selten, da es andere Routinetests gibt, die es ermöglichen, diese Mikroorganismen zu identifizieren.

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Basis

Die Kapsel ist eine starke Struktur einer Polysaccharid -Natur. Dies schützt Phagozytose -Mikroorganismen und ist daher eine schwierige Struktur, um zu durchdringen.

Deshalb basieren Kapselnbefärbung auf dem Kontrast. Die Farbstoffe färben den Boden der Zubereitung, während die Kapsel farblos ist.

Daher ist bei diesen Techniken die Kapsel leicht zu erkennen. Wenn der Mikroorganismus keine Kapsel hat, wird er nicht mit dieser Art von Färbung unterscheidbar, da alles aus derselben Farbe gefärbt wird.

Es kann Ihnen dienen: homologe und analoge Strukturen (mit Beispielen)

Alle zum Färben der Kapsel verwendeten Techniken haben die gleiche Grundlage, obwohl sie unterschiedliche Farben und Verfahren verwenden.

Techniken parzur Färbung der Kapsel

-Anthony -Färbung

Anthonys Färbung verwendet das violettes Glas als Farbstoff. Dies färbt den Bakterienkörper und den violetten Farbhintergrund.

Andererseits wird 20% Kupfersulfat verwendet. Dies dient als Waschlösung, dh das überschüssige violettes Glas der Zubereitung und führt dazu.

Materialien

- Shortaololate Milch.

- Tragbare Lamina.

- 1% violettes Glas.

- 20% Kupfersulfat.

- Optisches Mikroskop.

- Eintauchöl.

Verfahren

Diese Technik besteht aus:

1. Kultivieren Sie den Mikroorganismus in der Linesoladelymilch 36 Stunden lang.
2. Legen Sie einen Tropfen der Ernte am Ende eines Objekthalterblatts und platzieren.
3. Outdoor und nicht die Hitze reparieren.
4. Mit 20%Kupfersulfatlösung waschen, draußen ausgelassen.
5. Beobachten Sie das Mikroskop mit dem Eintauchziel. Suche nach den Extremen der erweiterten.

Es ist wichtig, keine Wärme oder Fix zu verwenden oder zu trocknen, da dies die Kapsel schädigt. Noch mit Wasser waschen.

Deutung

Shorted Milk ist ein ausgezeichnetes Kulturmedium, da sie die notwendigen Nährstoffe für den Mikroorganismus bietet, um eine prominente Kapsel zu entwickeln.

Andererseits bildet Litmolent -Milch einen dicken und kompakten Hintergrund, der zusammen mit dem Bakterienkörper gefärbt wird, aber die Kapsel, die den Mikroorganismus umgibt, ist farblos. Daher wird ein klarer Halo um den Bakterienkörper beobachtet.

Kann Ihnen dienen: Faktoren, die die enzymatische Aktivität beeinflussen Grafische Darstellung bei der mikroskopischen Beobachtung eines Abstrichs von Klebsiella pneumoniae mit der Färbung von Anthony gefärbt. Quelle: Hergestellt vom Autor MSC. Marielsa Gil.

Vorteile

Es ist eine einfache Technik, um durchzuführen. Es erfordert keine Fixierung.

Ebenso ist zu beachten.

Nachteile

Es ist etwas mühsamere Technik als negative Färbung, und für die Visualisierung müssen Sie darauf warten, dass die Vorbereitung trocknen kann.

-Negative Färbung

Materialien

- Folie.

- Kulturmedium mit Mikroorganismus.

- Chinesische oder Nigrosine Tinte.

- Optisches Mikroskop.

- Physiologische Kochsalzlösung.

Verfahren

Legen Sie einen Tropfen physiologischer Kochsalzlösung auf die Decke und lösen Sie einen kleinen Teil der mikrobiellen Ernte auf. Es ist wichtig, dass die Vorbereitung nicht sehr dick ist. Dann platzieren Sie einen Tropfen chinesischer oder Nigrosintinte und mischen Sie.

Dann wird ein Abdeckblatt auf die Vorbereitung platziert, ohne die Flüssigkeit zu überschreiten. Es wird am Mikroskop beobachtet, das sich zuerst auf das 10 -fache Ziel fokussiert und dann auf 40x übergeht.

Diese Technik kann auch direkt bei CSF -Proben verwendet werden. Das heißt, anstatt einen Tropfen mikrobieller Kultur zu platzieren, wird ein Tropfen platziert.

Vorteile

Es ist eine einfache Methode zur Ausführung und gleichzeitig wirtschaftlich. Es erfordert keine Fixierung oder Trocknung der Vorbereitung.

Nachteile

Es hat einen Nachteil, dass es im Mikroskop beobachtet werden sollte.

Andererseits können falsch positive Ergebnisse auftreten, wenn der Analytiker unerfahren ist, da Leukozyten normalerweise Hefen verwirren.

Die Beobachtung von Hefen mit Kapsel mit der chinesischen oder nigrosinen Technik sollte als mutmaßliche Diagnose von betrachtet werden Cryptococcus Neoformans Bis es mit Kultivierung demonstriert wird.

Dies liegt daran, dass es andere Hefen gibt, die die Ursache für Meningitis sein könnten, und nicht nur die Cryptococcus Neoformans, wie die der Gattung Candida und Rhodotorula sowie andere Arten von Kryptokokken.

Kann Ihnen dienen: Acetyl Coenzym zu

Deutung

Wenn es kapsulierte Mikroorganismen gibt, wird ein dunkler Hintergrund beobachtet, wobei transparente Körper in der Flüssigkeit schweben, wodurch das Vorhandensein der Kapsel hervorgehoben wird.

Cryptococcus -Kapsel Neoformans mit chinesischer Tinte gefärbt. Quelle: Fotokredit: Inhaltsanbieter (en): CDC/DR. Leanor Haley [Public Domain]

-Indische Tintentechnik

Diese Technik kann auch mit Nigrosine durchgeführt werden. Es ist eine Kombination der zuvor erklärten Techniken. Diese Technik verwendet violettes Kristall und Indien oder Nigrosine -Tinte.

Der bakterielle Körper nimmt die lila Farbe des violetten Glas. Wenn das Bakterium eine Kapsel hat, wird es als transparenter Halo um den Mikroorganismus angesehen.

Violettkristall kann durch eine dieser Farben ersetzt werden: Safranin, Basisfuchsin oder Methylenblau.

Materialien

- Violettglas.

- Nigrosine oder indische Tinte.

- Folie.

- Mikroskop.

Verfahren

- Kultivieren Sie den Mikroorganismus in einem Kulturmedium.

- Legen Sie einen Tropfen der Ernte am Ende eines Folienblatts und platzieren.

- Luft trocken und nicht die Wärme reparieren.

- Decken Sie mit einer violetten Glaslösung pro 1 Minute ab, waschen Sie mit destilliertem Wasser, aber sehr fein (weicher Strahl), im Freien ausgelassen.

- Beobachten Sie das Mikroskop mit dem Eintauchziel. Suche nach den Extremen der erweiterten.

Deutung

Ein violettes Bakterienkörper und ein dunkler Hintergrund werden beobachtet. Die Kapsel ist, falls vorhanden, farblos um die Bakterien.

Verweise

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