Negative Färbung

Bild der negativen Färbung des Grippevirus a. Quelle: Siehe Seite für den Autor Wikimedia Commons

Was ist negative Färbung?

Der negative Färbung Es ist eine spezielle Farbmethode, um das Vorhandensein der Kapsel in einigen Mikroorganismen hervorzuheben -miny Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae Und Cryptococcus Neoformans-, aus klinischen Proben oder reinen Pflanzen.

Die direkt verwendete direkte Probe zur Anwendung negativer Färbung ist die Cerebrospinalflüssigkeit. Diese Technik ist eine schnelle Alternative für die mutmaßliche Diagnose von Meningitis, insbesondere durch Cryptococcus Neoformans.

Diese Färbung kann im Allgemeinen auf sterile Sputum und Flüssigkeiten sowie auf Stämme aus jungen reinen Pflanzen angewendet werden. Die Technik verwendet Nigrosine oder chinesische Tinte für ihre Ausführung. Daher ist es eine sehr einfache und wirtschaftliche Methode, die sich in kurzer Zeit Informationen über einen hervorragenden diagnostischen Wert liefert.

In diesem Sinne befindet sich jedes Labor in der Fähigkeit, diese Färbung durchzuführen. Natürlich muss das Labor über ein kompetentes Personal verfügen, das die Hefen der Cryptococcus Neoformans isoliert oder in der Schlachtung und unterscheidet sie von Leukozyten und Artefakten, die die Probe vorhanden sein kann.

Basis

Nigrosine und chinesische Tinte handeln ähnlich, so dass beide Substanzen undeutlich verwendet werden können.

Diese Technik wird als negative Färbung bezeichnet, da sie gegen den Rest der Färbungstechniken wirkt. Dabei ist das, was ohne Färben ist, die Struktur, die gesucht wird oder die Sie sehen möchten, das heißt, Mikroorganismen.

Daher basiert die Färbung auf der Färbung des Bodens des Abstrichs in einer dunklen Farbe. In diesem Szenario werden kalkulierte Strukturen in Licht oder farblos hervorgehoben.

Normalerweise werden die Hefen beobachtet, umgeben von einem klaren Heiligenschein, der der Kapsel entspricht. Dies geschieht, weil chinesische Tinte und Nigrosin Substanzen sind.

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Es ist zu beachten, dass andere Strukturen, die in der direkten Probe vorhanden sein können, wie Leukozyten oder rote Blutkörperchen entweder.

Wenn Mikroorganismen tot sind, kann Tinktur in sie eindringen, so dass diese Färbung auch zur Bewertung der Lebensfähigkeit von Mikroorganismen nützlich ist.

Technik

Materialien

Nigrosine

Nigrosine verdankt seinen Namen der schwarzen Farbe, die sie hat. Es ist eine synthetische Substanz, die aus der Erwärmung der Mischung organischer Verbindungen wie Nitrobenzein, Anilin und Anilinhydrochlorit -erhalten wird, unter Verwendung dieser Reaktion einen Katalysator (Eisen oder Kupfer) unter Verwendung eines Katalysators (Eisen oder Kupfer).

Chinesische Tinte

Chinesische Tinte ist eine Substanz, die hauptsächlich von Asiaten zum Schreiben, der Ausarbeitung von Kunstwerken und monochromatischen Malerei verwendet wird. Es ist in der chinesischen Kultur sehr beliebt.

Es wird aus der Tintenfischtinte mit Pulverkohle gemischt, Produkte des Verbrennens kleiner harziger Bäume.

Es ist auch möglich, es aus dem Ruß der Kohlenwasserstoffverbrennung (Gemüseöle) zusammen mit einem Proteingele.

Spezifikationen für die Probenahme

• Es erfordert kein Fasten.
• Die Probenprobe, Sputum oder sterile Flüssigkeit muss mindestens 1 ml Volumen enthalten und muss bei Raumtemperatur in das Labor übertragen werden.
• CSF -Proben und sterile Flüssigkeiten sollten von einem spezialisierten Arzt entnommen werden.
• Es kann auch eine reine Ernte einer verdächtigen Stamm sein, die mit den oben genannten Krankheitserregern verbunden ist.

Ausführung der Technik mit direkten Proben

• Die Proben müssen zentrifugiert sein, dann wird der Überstand verworfen und das Sediment wird genommen.
• Ein Tropfen zentrifugiertes Material (Sediment) und ein Tropfen chinesischer oder Nigrosin -Tinte werden platziert.
• Es muss gut gemischt sein und mit einem Cover -Cover abdecken, damit der Tropfen sich wie ein guter Film erstreckt, ohne die Kanten zu überschreiten.
• Anschließend ist die Mikroskopvorstellung montiert.
• Wenn die Zubereitung sehr dunkel ist, kann sie mit Wasser verdünnt werden.

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Ausführung der Technik mit Stämmen durch Kultivierung

• Ein sehr kleiner Teil einer jungen Ernte wird mit einer gesätten Nadel eingenommen und löst sich in einem Tropfen chinesischer Tinte auf.
• Eine Abdeckung wird oben platziert.
• Es wird im 10 -fachen Mikroskop und dann bei 40x beobachtet.

Sie können auch einen Teil der Kolonie in destilliertem Wasser auflösen und von dort aus einen Tropfen nehmen und mit der chinesischen Tinte mischen. Auf diese Weise ist die Vorbereitung nicht so dick, was die Beobachtung der Strukturen isoliert ermöglicht. Wenn es Agglomerationen gibt, wird es nicht gut beobachtet.

Eine andere Methodik ist wie folgt:

• Legen Sie an einem Ende der Folie einen Aufhängungstropfen.
• Legen Sie einen Tropfen Nigrosin am selben Ende und mischen Sie.
• Erweitern Sie die Probe mit Hilfe einer anderen Folie, als würde sie einen hämatologischen Abstrich machen.
• Trocknen lassen und im Mikroskop beobachten.

Mikroskopbeobachtung

Zunächst muss es sich mit dem 10 -fachen Ziel konzentrieren, um eine breite Vision des Feldes zu haben. Anschließend müssen Sie nach klaren Räumen suchen. Wenn es gibt, konzentrieren Sie sich auf 40x, um die Details anzuzeigen.

Vorteile

• Es ist leicht auszuführen.
• Es ist eine wirtschaftliche Technik.
• Diese Methode erfordert nicht, dass der Abstrich auf Wärme oder mit Chemikalien festgelegt wird, daher werden Mikroorganismen ohne Verzerrungen beobachtet.
• Die Freskovorbereitung muss nicht trocken sein, sodass sofort beobachtet werden kann, was schnell Ergebnisse erzeugt.

Nachteil

• Nach dem Montieren müssen sofort frische Zubereitungen beobachtet werden. Wenn sie trocknen dürfen, ist es nicht mehr möglich, sie und eine neue zu beobachten.

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Tornning von Geweben mit chinesischer Tinte

Eine weitere Funktion, die chinesische Tinte erfüllen kann, ist in Pathology Laboratories. Dies wird in Proben von chirurgisch extrahiertem angewendet, um die Tumorresektionsmargen zu markieren.

Das markierte Gewebe wird mit Essigsäure besprüht. Dies wirkt als Unterricht und verhindert, dass die Tinte aussteigt, wenn das Gewebe der Routineverarbeitung für die Biopsievorbereitung unterliegt.

Das Verfahren besteht darin, den Stoff in Alkohol und Xylol zu baden und dann in Paraffinwachs einzubettet. Diese Markierung führt den Pathologen bei der Beobachtung des Gewebes, was darauf hinweist.

Verweise

1. Nigrosine. Von es geborgen.Wikipedia.Org.
2. Forbes, b., Sahm, d., Weissfeld, a. Mikrobiologische Diagnose von Bailey & Scott. Pan -American Editorial s.ZU.